Revista de Processamento e Tecnologia de Alimentos

Abstrato

Remoção seletiva de impurezas de fenilalanina do glicomacropeptídeo comercial de κ-caseína por cromatografia de troca aniónica

Nakano T e Ozimek L

O glicomacropeptídeo κ-caseína bovino (GMP) encontrado no soro de leite doce é um glicopeptídeo fosforilado com 64 resíduos de aminoácidos. Por não possuir aminoácidos aromáticos, incluindo a fenilalanina, acredita-se que o GMP é uma importante fonte dietética de aminoácidos para os doentes que sofrem de fenilcetonúria. Existe, no entanto, muito pouca informação disponível sobre a preparação de GMP isentos de fenilalanina para consumo humano. Este estudo foi, portanto, realizado para remover as impurezas contendo fenilalanina do GMP bruto comercialmente disponível por cromatografia de troca aniónica em dietilaminoetil (DEAE)-Sephacel. Os resultados demonstraram que as proteínas ou os péptidos que contêm fenilalanina não se ligam à coluna, enquanto a maior parte do GMP, representando 93% do total de ácido siálico recuperado, se pode ligar à coluna. O GMP purificado, que representou em média 43% do peso seco do GMP bruto, continha um nível indetetável de fenilalanina. As análises e a electroforese em acetato de celulose mostraram que o GMP purificado é um produto com um elevado teor de ácido siálico (média de 15,5% do peso seco). A cromatografia de filtração em gel em Sephacryl S-100 e a HPLC de exclusão de tamanho em Superdex 75 confirmaram as nossas descobertas anteriores de que os monómeros de GMP formam agregados e eluem como um único pico com o seu volume de eluição próximo do volume de eluição da β-lactoglobulina dimérica (36,6 kDa). Concluiu-se que a preparação bruta de GMP pode ser altamente refinada através da remoção seletiva de impurezas de fenilalanina utilizando cromatografia DEAE-Sephacel.