Lisha Zhao, Suzanne M. Budge, Abdel E. Ghaly, Marianne S. Brooks e Deepika Dave
Importante protease ácida, a pepsina é sintetizada e segregada na membrana gástrica num estado inativo denominado pepsinogénio (PG) e tem aplicações nas indústrias alimentar e transformadora, extração de colagénio, extração de gelatina e na regulação da digestibilidade. Os resíduos do processamento de pescado podem ser utilizados para produzir subprodutos comercialmente valiosos, como o pepsinogénio. No presente estudo, foi otimizada a purificação do pepsinogénio do estômago da perca vermelha utilizando sistemas bifásicos aquosos (SAB) formados por polietilenoglicol (PEG) e sal a 4ºC. Os efeitos do tipo de sal (MgSO 4 , (NH 4 ) 2 SO 4 , Na 3 C 6 H 5 O 7 e K 2 HPO 4 ) e da concentração (6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 , 15, 17, 19%) sobre a partição da PG foram estudados e parâmetros incluindo o volume total (TV), razão de volume (VR), atividade enzimática (AE), conteúdo proteico (Cp), atividade específica (SA), coeficiente de partição ( Foram avaliados Kp), dobra de purificação (PF) e rendimento de recuperação (RY). O tipo de sal e a concentração de sal tiveram efeitos significativos em cada parâmetro. MgSO 4 , (NH 4 ) 2 SO 4 , Na 3 C 6 H 5 O 7 e K 2 HPO 4 necessitaram de diferentes concentrações críticas de sal (9, 12, 12 e 10%, respectivamente) para formar sistemas bifásicos. A TV e a VR diminuíram com o aumento da concentração de sal, uma vez que o sal formou ligações de hidrogénio com as moléculas de água e criou uma estrutura de água mais compacta e ordenada. O AE, CP, SA, PF e RY apresentaram um aumento máximo com uma concentração de sal intermédia, enquanto o KP apresentou um padrão oposto. Os valores mais elevados de TV e AE foram obtidos com 12% (NH 4 ) 2 SO 4 enquanto os valores mais elevados de SA e PF foram obtidos com 12% de MgSO 4 . Os valores mais elevados de TV e Cp foram obtidos com 12 e 15% de Na 3 C 6 H 5 O 7 , respectivamente. (NH 4 ) 2 SO 4 na concentração de 15% deu o RY mais elevado (71,7%) e foi seleccionado como o tipo e concentração de sal ideais. Assim, 15% (NH 4 ) 2 SO 4 18% PEG 1500 foi a combinação ideal de SAB e apresentou a melhor partição. Os valores de SA e PF e RY obtidos pelo método ATPS foram duas vezes superiores aos obtidos pelo método de fracionamento com sulfato de amónio (ASF).