Revista de Processamento e Tecnologia de Alimentos

Abstrato

Extração e purificação de quimotripsina do intestino da perca vermelha (Sebastes marinus) utilizando micelas reversas: otimização da etapa de extração direta

Liang Zhou, Suzanne M. Budge, Abdel E. Ghaly, Marianne S. Brooks e Deepika Dave

Os resíduos do processamento de pescado podem ser utilizados para produzir subprodutos valiosos, como a quimotripsina, que tem aplicação nas indústrias alimentar, do couro, química e clínica. A quimotripsina é uma endopeptidase segregada pelos tecidos pancreáticos dos vertebrados e invertebrados. Foram utilizados sistemas de micelas reversas (RM) constituídos por AOT/isooctano para a purificação de quimotripsina a partir de extrato aquoso bruto de intestino de perca vermelha. Os efeitos do pH e da concentração de AOT na etapa de extração direta no Volume Total (TV), Razão de Volume (VR), concentração de proteína (Cp), atividade enzimática (AE), Atividade Total (TA), Atividade Específica ( SA), Foram estudados a Dobra de Purificação (PF) e o Rendimento de Recuperação (RY). O VT diminuiu com o aumento da concentração de AOT e diminuição do pH. A RV diminuiu ligeiramente com o aumento do pH, mas não foi afetada pela concentração de AOT. Os maiores AE, Cp, SA, PF e RY foram atingidos com pH 7,0 e concentração de AOT 20 mM. Maior quantidade de surfactante formou uma estrutura estável de mistura óleo-água e causou dificuldades na etapa de extração inversa. Quando o pH foi aumentado de 6,0 para 7,0 e/ou a concentração de AOT foi aumentada de 1 para 20 mM, o AE, Cp, SA e RY aumentaram inicialmente e depois diminuíram com aumentos adicionais do pH e/ou da concentração de AOT. Os aumentos destes parâmetros deveram-se ao aumento da interação eletrostática entre a carga líquida na superfície da molécula proteica e a carga da camada interna das micelas inversas provocada pelo aumento do pH e ao aumento da estrutura das micelas inversas provocado pelo aumento da concentração de AOT . As diminuições destes parâmetros deveram-se à diminuição da carga líquida nas moléculas proteicas que enfraqueceu a interação eletrostática entre a quimotripsina e as micelas reversas. Os AE, TA, SA, PF e RY obtidos com o método RM foram superiores aos obtidos com o método do Sulfato de Amónio (AS) em 2,16-2,82 vezes.