Jornal de Farmacogenômica e Farmacoproteômica

Abstrato

Caracterização proteómica da ubiquitina-ligase E3 Hakai: insights biológicos e novas estratégias terapêuticas no cancro do cólon

Angélica Figueroa

O carcinoma é o tipo de cancro mais comum e surge a partir das células epiteliais. A transição do adenoma para o carcinoma está associada à perda da E-caderina e, consequentemente, à interrupção dos contactos célula-célula. A perda de caderina-E é uma característica marcante da transição epitelial-mesenquimal (EMT) e um preditor de mau prognóstico durante a progressão tumoral. O Hakai é uma ubiquitina-ligase E3 que medeia a ubiquitinação da E-caderina, a endocitose e a consequente degradação. Embora a E-caderina seja o substrato mais estabelecido para a atividade do Hakai, outros alvos moleculares regulados para o Hakai podem estar envolvidos na plasticidade das células cancerígenas durante a progressão tumoral. Empregamos uma abordagem iTRAQ para explorar novas vias moleculares envolvidas na EMT conduzida por Hakai. Os nossos resultados mostram que o Hakai pode ter uma influência importante nas proteínas relacionadas com o citoesqueleto, nas proteínas extracelulares associadas aos exossomas, nas proteínas relacionadas com o RNA e nas proteínas envolvidas no metabolismo. Entre as proteínas reguladas por Hakai, descrevemos o complexo acompanhante da proteína de choque térmico 90 (Hsp90). A Hsp90 participa no correto enovelamento das suas proteínas clientes, permitindo-lhes manter a sua estabilidade e atividade. Por imunoprecipitação, apresentamos evidências de que o Hakai interage com o complexo chaperona Hsp90 em diversas células epiteliais e demonstramos que se trata de uma nova proteína cliente Hsp90. A inibição farmacológica da Hsp90 com geldanamicina resulta na degradação do Hakai de uma forma dependente do lisossoma. Curiosamente, a degradação de Hakai induzida pela geldanamicina é acompanhada por um aumento da expressão de E-caderina e Anexina A2. Mostrámos também que a geldanamicina suprime a motilidade celular, pelo menos em parte, através da sua acção na expressão de Hakai. Propomos o Hakai como uma nova proteína cliente do acompanhante Hsp90, destacando um novo mecanismo pelo qual os inibidores da Hsp90 podem influenciar o processo EMT mediado por Hakai e o tratamento do cancro colorretal.