Jornal de Bacteriologia e Parasitologia

Abstrato

Uso de hibridização in situ para localizar Wolbachia durante a embriogênese em Brugia malayi

Daojun Jiang, Peter U. Fischer e Gary J.Weil

Wolbachia são bactérias intracelulares necessárias para o desenvolvimento e reprodução na maioria dos nematoides filariais. Novas abordagens são necessárias para melhorar a compreensão do papel da Wolbachia na biologia filarial. Estudos recentes usando imuno-histologia fluorescente revelaram segregação assimétrica de Wolbachia em embriões iniciais de Brugia malayi, e isso ajuda a explicar a distribuição restrita de Wolbachia em vermes adultos. No entanto, a distribuição de Wolbachia em estágios finais do desenvolvimento embrionário ou em larvas infectantes (L3) é amplamente desconhecida. Neste estudo, exploramos o uso da hibridização in situ (ISH) para localizar Wolbachia e a expressão do gene Wolbachia durante a embriogênese e morfogênese em B. malayi.

ISH com uma sonda 16S rRNA revelou Wolbachia nos cordões laterais, ovócitos e embriões de orms fêmeas de B. malayi. Isso foi consistente com estudos anteriores que detectaram Wolbachia por imuno-histologia. ISH com sondas para o gene da proteína de superfície Wolbachia (wsp) e o gene da via biossintética do heme Wolbachia (hemE) mostrou que esses genes foram fortemente expressos em embriões iniciais, mas não em embriões em estágio posterior (“vírgula”, “pretzel” ou microfilárias intrauterinas esticadas). Um estudo detalhado da distribuição de Wolbachia em embriões de B. malayi usando ISH com a sonda 16S rRNA documentou a segregação assimétrica de Wolbachia em embriões iniciais (mórulas) e mostrou que Wolbachia estava presente apenas em células precursoras do cordão hipodérmico em embriões em estágio posterior (estágio “vírgula” ou posterior). A localização progressivamente restrita de Wolbachia durante a morfogênese pode explicar por que Wolbachia está ausente do primórdio genital em L3.

A distribuição e a expressão genética da Wolbachia variam dramaticamente durante o desenvolvimento do embrião filarial e ao longo do ciclo de vida do verme. Pesquisas adicionais são necessárias para entender a dinâmica populacional específica do tecido da Wolbachia e para explorar como os sinais do hospedeiro nematoide podem influenciar o crescimento, a distribuição e a expressão genética nessas bactérias.