Jornal de tecnologia microbiana e bioquímica

Abstrato

O micoparasitismo de Trichoderma reesei contra Pythium ultimum é coordenado pela sinalização da proteína G-alfa GNA1

Valdirene Neves Monteiro, Andrei Stecca Steindorff, Fausto Bruno dos Reis Almeida, Fabiano Alvares Cardoso Lopes, Cirano JoséUlhoa, Carlos Roberto Félix e Roberto Nascimento Silva

O Trichoderma reesei (Hypocrea jecorina) é amplamente explorado na indústria e o seu potencial para utilização na agricultura como agente de biocontrolo contra fungos fitopatogénicos apenas começa a ser investigado. Investigámos o envolvimento das proteínas G durante o micoparasitismo contra agentes patogénicos de plantas. Aqui descrevemos o papel da GNA1, uma proteína G-alfa que pertence ao grupo αi na produção de Enzimas Degradantes da Parede Celular (CWDEs) por T. reesei durante o antagonismo contra Pythium ultimum. Para tal, foram utilizados dois mutantes: Δgna1 e gna1QL (=versão constitutivamente ativada do GNA1). O mutante gna1QL de T. reesei, tal como o TU-6 parental, inibiu o crescimento de P. ultimum no ensaio de confronto de placas e cresceu mais rapidamente que o TU-6 parental, enquanto o Δgna1 não cresceu sobre P. ultimum. A microscopia eletrónica de varrimento mostrou que o mutante gna1QL promoveu mais alterações morfológicas da parede celular de P. ultimum do que o parental TU-6, enquanto o Δgna1 não causou efeitos. O mutante Δgna1 apresentou menos atividade das CWDEs que o gna1QL e o TU-6 durante as culturas in vitro. O mutante gna1QL apresentou um melhor desempenho na produção de CWDEs como a endoquitinase, N-acetil-β-D-glucosaminidase (NAGase), lipase e fosfatase ácida, após 72 horas de incubação. No entanto, o parental TU-6 apresentou maior atividade de celulase que o gna1QL e o Δgna1. O conteúdo intracelular de AMPc nas estirpes após 72 horas de incubação na presença de parede celular de P. ultimum foi: gna1QL (79,85 ± 12), Δgna1 (268,65 ± 8,5) e TU-6 (109,70 ± 9,2) pmol/mg de proteína . Os resultados do RT-qPCR mostraram um baixo nível de transcrições de genes específicos do micoparasitismo na estirpe Δgna1. Sugerimos, assim, que a produção de alguns CWDEs durante o micoparasitismo por T. reesei contra P. ultimum pode ser mediada pela atividade do GNA1 ou pelos níveis de AMPc.