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Abstrato
A imunidade treinada em monócitos de doentes ateroscleróticos está associada a um aumento da atividade mitocondrial e do nível de colesterol intracelular
Nikita G. Nikiforov
O treino dos monócitos circulantes pode ser responsável pela formação de inflamação crónica na parede arterial. Avaliámos a capacidade de ativação de monócitos circulantes isolados do sangue de doentes ateroscleróticos e tentámos encontrar fatores responsáveis.
O estudo envolveu dadores saudáveis (N=36) e doentes com aterosclerose subclínica (N=40) diagnosticada por medição ecográfica da espessura médio-intimal das artérias carótidas comuns (IMT). Os monócitos foram isolados por separação magnética de CD14+ e incubados com 1 µg/ml de LPS durante 24 h, seguindo-se a medição da secreção de TNF por ELISA. Paralelamente, o nível de colesterol intracelular dos monócitos circulantes foi avaliado através do AmplexRedCholesterol Kit. Os monócitos foram também incubados com 100 ug/ml de ácido 5-aminolevulínico durante 4 horas para induzir a acumulação de protoporfirina IX (PpIX). A fluorescência do PpIX e do corante Mitotracker dependente do potencial foram visualizadas por microscopia confocal e analisadas com o software ilastic.
A secreção de TNF aumentou significativamente em monócitos estimulados por LPS isolados do sangue de doentes ateroscleróticos em comparação com participantes saudáveis. As fortes correlações entre a secreção de TNF e o nível de colesterol total intracelular com o cIMT foram observadas, indicando que os monócitos dos doentes ateroscleróticos aumentaram o estado inflamatório, bem como aumentaram o conteúdo de colesterol total. Surpreendentemente, a secreção de TNF pelas células estimuladas por LPS e cIMT teve uma correlação significativa com a relação Mitotracker/PpIX dos monócitos, indicando que os monócitos treinados de doentes ateroscleróticos são caracterizados por uma maior atividade mitocondrial.
Demonstramos que os monócitos imunologicamente treinados que circulam em doentes ateroscleróticos com aumento da EIMC são caracterizados por um aumento do nível de colesterol total intracelular e da atividade mitocondrial.
Apoiado pela RSF (Concessão nº 20-65-46021).