Genética hereditária: pesquisas atuais

Abstrato

A utilização de genotipagem por PCR em tempo real para detetar mutações ativadoras de GNAS na síndrome de McCune-Albright

Mariani BMP, Trarbach EB, Toledo RA, Lerario AM, Latronico AC, Mendonça BB e Fragoso MCBV

Introdução: A síndrome de McCune-Albright (SAM) é uma doença genética caracterizada clinicamente pela tríade: displasia fibrosa óssea, manchas café-com-leite e hiperfunção endócrina, como a puberdade precoce. A MAS deve-se a mutações activadoras do GNAS, gene que codifica os Gs alfa e a análise de mutações deste gene poderá aumentar o diagnóstico definitivo de MAS e atípica e parcial. Objectivos: Identificar o p.R201H e p. Mutações ativadoras de GNAS R201C em múltiplos tecidos derivados de doentes com SAM utilizando genotipagem por PCR em tempo real. Material e métodos: O ADN genómico foi isolado do sangue de 31 doentes (28 mulheres) com formas típicas e atípicas de SAM. Amostras de pele, glândula suprarrenal ou tecido ósseo também estavam disponíveis de seis doentes diferentes. A genotipagem baseada no ensaio de PCR em tempo real utilizando sondas TaqMan foi realizada para a identificação de p.R201H e p. Mutações R201C GNAS. A clonagem e a sequenciação foram utilizadas como técnicas de consentimento. Resultados: Através da genotipagem por PCR em tempo real, não foram identificadas mutações no GNAS em amostras de sangue de doentes com SAM, apenas numa amostra óssea de um doente com p.R201H previamente identificado. A clonagem e sequenciação do sangue deste mesmo doente revelou que 5/150 clones albergando o p. R201H. Conclusão: A genotipagem por PCR em tempo real mostrou-se eficiente para o diagnóstico molecular de SAM em tecidos de doentes afetados. As vantagens desta técnica são a rapidez, a precisão, é geralmente fácil de executar e pode ser utilizada de forma rotineira. No entanto, a otimização da deteção da mutação GNAS é ainda necessária para considerar esta técnica para o diagnóstico precoce de formas não clássicas de MAS utilizando sangue periférico.