Jornal de Patologia Vegetal e Microbiologia

Abstrato

Comparação de anticorpos criados contra PLRV com duas abordagens diferentes - Purificação de partículas virais e produção recombinante de CP

Aseel DG e Hafez EE

A sorologia é uma das técnicas mais importantes amplamente utilizadas em diferentes campos, especialmente na agricultura. Os métodos sorológicos geralmente são amplamente utilizados devido à sua especificidade no diagnóstico de doenças e relativa facilidade de conclusão. Os métodos amplamente utilizados em virologia vegetal incluem ensaio imunoenzimático, imunoensaio de dot-blot, microscopia eletrônica imunoespecífica e imunoensaio de tissue-blot. A pedra fundamental do teste sorológico é o antissoro, que é mono ou poli. Devido ao alto custo da produção de monoantissoros e sua baixa sensibilidade dos imunizados pelas partículas virais purificadas, a proteína recombinante pode ser uma boa substituição. Neste estudo, objetivamos produzir polissoros usando as partículas virais e com a proteína de revestimento recombinante do vírus Potato Leaf Roll e usamos ambos na imunização de coelhos separadamente. A sensibilidade, especificidade e reatividade dos dois soros produzidos foram testadas em comparação com a reação em cadeia da polimerase em tempo real. Os resultados revelaram que os polissoros produzidos pela proteína de revestimento recombinante são mais específicos e sensíveis do que os soros produzidos pelas partículas purificadas. Além disso, os resultados obtidos por dot e tissue blot confirmaram os resultados obtidos por técnicas de ensaio imunoenzimático. Os resultados da reação em cadeia da polimerase em tempo real foram semelhantes aos obtidos por métodos sorológicos, exceto o tempo e o substrato. Em conclusão, a produção de polissoros usando proteína recombinante é um teste fácil, barato e sensível para detecção de frasco on-line.