Naotaka Furuichi, Masatoshi Ohta, Hisakazu Okamura, Tuneyoshi Horigome e Kazutoshi Yokokawa
Representando o supressor para morte celular hipersensível de célula vegetal, glucano de Phytophthora infestans (Pi) foi relatado, e que o supressor inibiu o acúmulo de fitoalexina e morte celular hipersensível. Para avaliar a ativação da proteína quinase dependente de cálcio (CDPK) após a ligação do supressor de Pi, a espectroscopia de correlação de fluorescência (FCS) foi aplicada ao GFP-CDPK único e ao supressor marcado com Alexa. Construímos proteína quimérica, FP verde fundido em tandem (GFP)-CDPK e supressor com os anticorpos supressores marcados com Alexa 633 (Abs). O FCS de duas cores fornece informações sobre a coincidência de duas moléculas fluorescentes espectrais em um nível de molécula única. Aqui relatamos que para a inibição da NADPH oxidase da batata, o supressor ligado ao peptídeo CDPK (peptídeos de domínio quinase-I e -III), CDPK fosforilou a NADPH oxidase no ensaio de gel quinase, e que a geração de oxigênio ativo pela NADPH oxidase foi inibida pelo supressor. Isso significa que o supressor inibidor de HR do patógeno vegetal controla a formação de radicais superóxido na célula vegetal pelo sinal da fosforilação por uma CDPK.