Jornal de pesquisa e terapia com células-tronco

Abstrato

O potencial angiogénico das vesículas extracelulares derivadas de células estaminais mesenquimais adiposas é modulado pelo fator de crescimento básico de fibroblastos

Tatiana Lopatina, Aurora Mazzeo, Stefania Bruno, Ciro Tetta, Natalia Kalinina, Renato Romagnoli, Mauro Salizzoni, Massimo Porta e Giovanni Camussi

Objectivo: O objectivo do presente estudo foi investigar os efeitos do factor de crescimento básico de fibroblastos (bFGF) nas propriedades angiogénicas de vesículas extracelulares (EVs) segregadas por células estaminais mesenquimais derivadas do tecido adiposo (ASCs) em cultura.
Métodos: Isolamos VEs de ASC (ASC-EVs) cultivados com bFGF (FGF-EVs) ou sem bFGF (b-EVs). Comparámos a ação angiogénica do VE em células endoteliais microvasculares humanas (HMEC) in vitro por ensaio de formação de estrutura semelhante a capilar e in vivo por injeção subcutânea de Matrigel contendo HMEC em ratinhos SCID. Analisámos a composição de micro-RNAs dos VEs por PCR array e seleccionámos dois mi-RNAs alterados após estimulação com bFGF: miR-223 e miR-21. Transfectámos o HMEC com anti-miR-223 anti-sentido curto ou com miR-21 mimético para compensar a ação dos VE.
Resultados: In vitro, o comprimento total e o número de ramificações de estruturas semelhantes a vasos formadas por HMEC estimulado por FGF-EV foram significativamente reduzidos em relação à estimulação b-EV e as estruturas foram significativamente maiores do que após a estimulação b-EV . In vivo, os vasos formados por HMEC estimulados por FGF-EV eram significativamente mais baixos em número em relação aos formados por HMEC estimulados por b-EV, mas eram significativamente maiores em tamanho e continham células positivas para actina de músculo liso de ratinho. Verificámos que o bFGF levou a alterações moleculares nos ASCEVs caracterizadas pela diminuição da expressão de fatores angiogénicos . Além disso, a estimulação do bFGF regulou positivamente a expressão do miR-223 anti-angiogénico e diminuiu o nível do miR-21 pró-angiogénico. Os efeitos dos FGFEVs foram antagonizados
pela inibição do miR-233 e pelo mimetizador do miR-21. . Em particular, o bFGF induz a produção de VE que estimulam a estabilização dos vasos, em vez de um aumento do número de vasos.