Jornal do Fígado

Abstrato

Geração bem sucedida de partícula de pseudotipo do vírus da hepatite B (HBV); Uma ferramenta versátil para a identificação do receptor do VHB e investigação da infectividade do VHB

Keiji Ueda e Hiroko Omori

Já passou quase meio século desde que o vírus da hepatite B (HBV) foi identificado. As moléculas recetoras do VHB e o mecanismo de entrada do VHB nos hepatócitos não foram completamente elucidados, embora existam alguns relatos sobre sistemas de infeção e sobre as moléculas recetoras. Assim, ainda não conseguimos encontrar um receptor real do VHB e não houve nenhum sistema de infecção útil e conveniente in vitro e in vivo para o VHB, o que nos impossibilita a compreensão de um ciclo de vida preciso do VHB e de doenças relacionadas envolvidas com o HBV. Um sistema de infecção pelo VHB é realmente necessário para explorar formas e meios de tratamento de doenças relacionadas com o VHB com base em evidências. Aqui, desenhámos e tentámos gerar um pseudotipo de HBV, que possui uma partícula viral contendo um capsídeo de retrovírus e um genoma no seu interior rodeado por proteínas de membrana do HBV. Provámos a geração bem-sucedida deste pseudotipo por imunoprecipitação com anticorpos anti-HBVs e por ultracentrifugação em gradiente de densidade CsCl, seguida de RT-PCR visando um gene retroviral, neste caso um gene EGFP, respetivamente. Embora o nosso sistema estabelecido seja construído com base na integração dependente do crescimento dos genomas retrovirais e, portanto, tenha sido muito difícil observar a sua infeção num sistema primário de cultura de hepatócitos humanos, a geração bem-sucedida do pseudotipo de HBV tornar-nos-á possível realizar um ensaio biológico para clonar um Receptor do VHB baseado na infectividade e facilitará a sua separação e identificação