Hui Dai, Weifeng Gu
O sequenciamento de alto rendimento tornou-se uma ferramenta padrão e poderosa para a análise de ácidos nucleicos, principalmente devido à sua sensibilidade e conveniência. Os pequenos ARN desempenham papéis importantes na regulação de genes celulares e virais. Os métodos convencionais para análises de RNA pequeno são fastidiosos e muitas vezes não têm precisão, especificidade e sensibilidade para muitas espécies de RNA pequeno. Assim sendo, a sequenciação de alto rendimento torna-se uma ferramenta indispensável para a análise de pequenos RNAs. No entanto, é um desafio gerar uma pequena biblioteca de RNA fiável e representativa para sequenciação de alto rendimento, uma vez que os pequenos RNA são geralmente expressos a níveis extremamente baixos e muitas vezes contêm modificações que afetam a construção da biblioteca, causando geralmente leituras enviesadas. Esta revisão compara várias estratégias para gerar pequenas bibliotecas de RNA de alta qualidade e fiabilidade, e fornece recomendações sobre as melhores práticas na preparação de bibliotecas de RNA de sequenciação de alto rendimento.