Saúde Bucal e Gestão Odontológica

Abstrato

Estandardização do Isolamento e Expansão das Células do Tecido Conjuntivo da Mucosa Oral

Fernandes LA, Nascimento BL, Lucato-Budziak MC, Figueiredo CM, Carneiro E

Objectivo: O objectivo deste estudo foi estabelecer um protocolo para o isolamento e expansão de uma população de células fibromesenquimais do tecido conjuntivo da mucosa oral para futuros protocolos de bioengenharia. Métodos: Para o isolamento de fibroblastos e células progenitoras foram utilizados pedaços de amostras cirúrgicas de doentes com indicação para cirurgia oral. O protocolo de isolamento foi o seguinte: o tecido foi lavado com solução salina tamponada com fosfato (PBS) suplementada com antibiótico-antimicótico (PSA). O tecido foi colocado num tubo de ensaio contendo colagenase tipo II e incubado durante a noite na estufa. Após a incubação, a colagenase foi recolhida e o tecido foi novamente lavado uma vez com PBS + PSA. Posteriormente foi realizado o teste de Unidade Formadora de Colónias (UFC). As células (1,0 x 105) foram plaqueadas numa placa de 10 cm² contendo Meio de Eagle Modificado por Dulbecco (DMEM) com alto teor de glicose, suplementado com 10% de Soro Fetal Bovino (FBS). As células foram fixadas com formalina a 10% e coradas com cristal violeta antes da contagem das colónias. O ensaio foi realizado em triplicado. Resultados: As células de todas as amostras apresentaram uma morfologia homogénea com um aspeto estrelado característico. A única diferença estava no número de colónias formadas. Verificou-se um aumento significativo do número de colónias formadas no dia 1 quando comparadas com as formadas no dia 0, e uma diminuição significativa quando comparadas com as formadas no dia 2. Conclusão: Foi possível estabelecer um protocolo para a cultura primária de fibroblastos derivados da mucosa oral humana.