Jornal de Bacteriologia e Parasitologia

Abstrato

Identificação de espécies de bactérias e fungos a partir de meios de cultura sólidos e líquidos por espectrometria de massa MALDI-TOF

Marco Reich, Philipp P Bosshard, Maik Stark, Kurt Beyser e Stefan Borgmann

Nos últimos anos, a espectrometria de massa MALDI-TOF se tornou uma ferramenta poderosa para a identificação de espécies de bactérias e fungos cultivados. No presente estudo, a implementação da espectrometria de massa MALDI-TOF em um laboratório comercial de alto rendimento é descrita. O impacto de diferentes condições de crescimento nos resultados da identificação foi avaliado. Embora pequenas diferenças nos espectros MALDI-TOF de cepas de E. coli e S. aureus cultivadas em ágar sangue por vários períodos (5, 18, 24 e 48 horas) tenham sido notadas, a identificação confiável das espécies foi obtida para todos os períodos. O mesmo foi verdadeiro quando as cepas de E. coli e S. aureus foram cultivadas por 18 horas em vários meios sólidos. A identificação confiável também foi obtida quando os fungos foram cultivados em meios sólidos e líquidos (caldo Sabouraud). Além disso,
o crescimento de fungos em caldo resultou em identificação acelerada. A espectrometria de massa MALDI-TOF também permitiu a identificação confiável de microrganismos de amostras positivas de hemocultura. No total, 2.900 espécimes (234 espécies diferentes) predominantemente derivados de amostras clínicas foram examinados. Os microrganismos foram cultivados em meios sólidos, em frascos de hemocultura e em caldo Sabouraud líquido. 98,6% (n=2.860) dos resultados de identificação MALDI-TOF corresponderam aos dos métodos convencionais (por exemplo, coloração de Gram, capacidade de degradação de carboidratos, sistema Phoenix) e sequenciamento do produto 16S rDNA PCR. As incompatibilidades foram baseadas principalmente em espectros de referência ausentes no banco de dados do sistema de análise. O estudo foi realizado em 2009. Devido à melhoria contínua do banco de dados, uma precisão ainda maior seria alcançada ao realizar o estudo atualmente. Em resumo, o uso da espectrometria de massa MALDI-TOF em um ambiente clínico de alto rendimento leva a resultados confiáveis, mesmo quando várias condições de cultura são usadas, por exemplo, caldos para cultura de fungos. A espectrometria de massa MALDI-TOF é um sistema de identificação rápido e robusto, que está a caminho de se tornar um novo padrão para a identificação de microrganismos em laboratórios de alto rendimento.