Pharmaceutica Analytica Acta

Abstrato

Quantificação simultânea de Bergenina, (+)-Catequina, Galicina e Ácido gálico; e quantificação de β-Sitosterol usando HPTLC de Bergenia ciliata (Haw.) Sternb. Forma ligulata Yeo (Pasanbheda).

Rathee Dharmender, Thanki Madhavi, Agrawal Reena e Anandjiwala Sheetal

No presente artigo, relatamos nosso trabalho sobre o desenvolvimento e validação do método densitométrico TLC para quantificação simultânea de Bergenina, (+)-Catequina, Galicina e ácido gálico, e quantificação de β-Sitosterol usando HPTLC. Até onde sabemos, este é o primeiro relato de quantificação simultânea desses quatro compostos bioativos, a saber, Bergenina, (+)-Catequina, Galicina e ácido gálico usando HPTLC desta planta. A quantificação simultânea de Bergenina, (+)-Catequina, Galicina e ácido gálico foi realizada a partir do extrato metanólico e hidrolisado (HCl 2N) usando o Sistema Solvente de Tolueno: Acetato de etila: Ácido fórmico (6: 6: 1, v/v/v). O β-Sitosterol foi quantificado a partir do extrato de éter de petróleo usando o Sistema Solvente de Tolueno: Metanol (9:1, v/v). Os métodos foram validados usando as diretrizes do ICH em termos de precisão, repetibilidade e exatidão. Os métodos densitométricos de cromatografia em camada fina foram considerados precisos com RSD para intra-dia na faixa de 2,62–4,26, 0,35–2,5, 0,61–1,83, 1,14–1,57 e 0,15–0,52 e para interdiário na faixa de 1,90–4,27, 0,85–3,05, 0,97–1,45, 0,58–1,27 e 0,26–0,61 para diferentes concentrações de Bergenina, (+)-Catequina, Galicina, Ácido Gálico e β-Sitosterol, respectivamente. As faixas de linearidade para Bergenina, (+)-Catequina, Galicina e Ácido Gálico foram consideradas as mesmas (160–720 ng/ponto) com coeficientes de correlação (valores de r) de 0,999, 0,997, 0,998 e 0,996, respectivamente. A faixa de linearidade para β-Sitosterol foi de 80–480 ng/ponto com coeficiente de correlação (valores de r) de 0,995. A precisão instrumental foi de 3,39, 3,36, 3,05, 1,20 e 0,85 (% RSD) para Bergenina, (+)-Catequina, Galicina, Ácido Gálico e β-Sitosterol, respectivamente. A precisão do método foi verificada pela condução de estudos de recuperação em três níveis diferentes para ambos os compostos e as recuperações percentuais médias obtidas foram 100,38, 101,45, 102,38, 99,9 e 99,92%, respectivamente, para Bergenina, (+)-Catequina, Galicina, Ácido gálico e -Sitosterol. A quantidade de Bergenina, (+)-Catequina e Ácido gálico foi de 0,22, 0,063 e 0,25% p/p, respectivamente, enquanto Galicina não estava em quantidade detectável. O método desenvolvido permitiu a quantificação simultânea de Bergenina, (+)-Catequina, Galicina e Ácido gálico, e mostrou boa resolução e separação de outros constituintes do extrato e foi considerado simples, preciso, específico, sensível e exato. Ele pode ser adotado para controle de qualidade de rotina de material herbal e formulações contendo Bergenia ciliata.