Jornal de Bioequivalência e Biodisponibilidade

Abstrato

Estimativa simultânea de fluoxetina e norfluoxetina no plasma por RP-HPLC empregando derivatização de pré-coluna para aumento da sensibilidade UV

Smita T Kumbhar, Kundan B Ingale Prafulla B Choudhari e Manish S Bhatia

Um método cromatográfico líquido rápido de alto desempenho é descrito para a estimativa simultânea do fármaco antidepressivo amplamente utilizado, fluoxetina e seu principal metabólito norfluoxetina no plasma humano. A derivatização pré-coluna de norfluoxetina foi feita usando 4-dimetilaminobenzaldeído (PDAB) para superar as limitações de sensibilidade da norfluoxetina. Após a extração líquido-líquido, a separação dos analitos e do padrão interno da interferência da matriz endógena foi obtida usando uma coluna HIQ sil ODS de fase reversa (250 mm de comprimento x 4,6 mm de diâmetro interno) KYA TECH (Japão) e analisada por absorção ultravioleta a 227 nm. A fase móvel isocrática (1 ml/min.) consistindo de acetonitrila: água: trietilamina: 0,01 M de ácido ortofosférico (OPA) (70:30:0,5:2) foi usada para separar fluoxetina, norfluoxetina e o padrão interno, nebivolol. Os tempos de retenção relativos foram 2,49, 4,24 e 7,29 min para norfluoxetina, fluoxetina e nebivolol, respectivamente. O tempo de execução cromatográfica foi de 10 min e as razões de área de pico dos analitos para IS foram usadas para análise de regressão da curva de calibração. A linearidade foi obtida na faixa de concentração de 10-60 μg/ml para ambas as substâncias. A média de % de recuperação ± DP foi encontrada em 101,23% ± 1,0 e 100,69 ± 0,67 para fluoxetina e norfluoxetina, respectivamente. O método parece adequado, em termos de exatidão e precisão, para a determinação dos níveis plasmáticos de fluoxetina do paciente; além disso, é rápido e sensível.