Química Moderna e Aplicações

Abstrato

Método HPLC-UV curto e robusto para determinar a concentração sérica de ribavirina sem etapa de evaporação

Abdul Rafiq Khan, Ali Al-Othaim, Khalid Muhammed Khan, Shazia Mrtaza, Sara Altraif, Waleed Tamimi, Waqas Jamil e Ibrahim Altraif

Objectivo: A posologia da ribavirina (RBV) é importante para a monitorização terapêutica de medicamentos em doentes com hepatite C. Um método simples e rápido de cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) desenvolvido e validado para medir a concentração de ribavirina em amostras de soro sem etapa de evaporação.

Desenho e método: Cerca de 500 μl de amostra de soro, 50 μl de padrão interno e tampão de acetato de amónio 20 mM (pH = 8,5) foram misturados durante 30 segundos e centrifugados. O sobrenadante foi transferido para cartuchos pré-condicionados de ácido fenil borónico para extração em fase sólida. Todos os cartuchos foram lavados duas vezes com 1 mL de tampão acetato de amónio 20 mM sob vácuo não superior a 10 psi. A ribavirina e o padrão interno foram eluídos com 300 μl de ácido fórmico a 3%. Uma alíquota de 100 μl foi injetada no sistema HPLC.

Resultados: O método foi linear na gama de 0,1-8,0 mg/l com 0,05 mg/l como limite de deteção. O coeficiente de correlação de comparação dos métodos foi de 0,975 com um valor de p de 0,116 evidenciando uma boa reprodutibilidade dos resultados. A precisão média foi verificada em três concentrações diferentes e encontrada entre 107-110% para todos os três níveis. A eficiência de extração foi de 65,5% para a ribavirina na gama de 0,1-8,0 mg/l e de 71,2% para o padrão interno a 50 mg/l. As precisões intra-ensaio foram determinadas em 0,5, 2,5 e 5,0 mg/le a % CV foi de 2,2%, 5,0% e 4,5%, respectivamente. A reprodutibilidade da injeção a três níveis foi de 5,5%, 6,1% e 3,3%. A remoção do fluxo gravitacional e da etapa de evaporação tornou este método mais rápido e fácil para a análise de rotina de amostras de ribavirina.

Conclusão: O método HPLC recentemente desenvolvido foi mais rápido, preciso e sensível. Aplicou-se para determinar o nível sérico de ribavirina em doentes com hepatite C no nosso hospital.