Jornal de Distúrbios do Sangue e Transfusão

Abstrato

Soro produzido a partir de plasma fresco congelado vencido e criosobrenadante auxilia na proliferação de células humanas: alternativas econômicas ao soro fetal bovino

Kazuki Ishiyama, Mika Ogawa, Hidefumi Kato, Kyosuke Takeshita, Ryuzo Ueda, Takayuki Nakayama*

Histórico: O soro bovino fetal (FBS) é o fator de crescimento mais comum usado em cultura de células. No entanto, as demandas por suplementos de cultura de células livres de xeno para uso clínico que estejam em conformidade com os padrões de boas práticas de fabricação estão aumentando à medida que as terapias celulares se expandem. O soro humano foi proposto como uma alternativa ao FBS. Devido à disponibilidade limitada de doadores e ao uso eficaz de recursos médicos, tentamos produzir soro a partir de plasma fresco congelado (FFP) e criosobrenadante (CS) vencidos e os testamos como substitutos do FBS.

Resultados: Descobrimos que a incubação de 1 hora de FFP ou CS com um nível fisiológico de trombina e cloreto de cálcio (CaCl2 ₎ esgotou virtualmente todo o fibrinogênio. Estudos comparativos de proliferação com FBS e lisados ​​de plaquetas humanas (hPLs) mostraram que, em comparação com FBS, o soro FFP exibiu efeitos proliferativos semelhantes ou maiores em 8 linhas de células humanas: células estromais mesenquimais derivadas da medula óssea (BMSC), células estromais mesenquimais derivadas do tecido adiposo (ADSC), HeLa, 293T, MG-63, HL-60, K562 e Meg-A2, exceto para células Saos-2, enquanto o soro CS exibiu efeitos proliferativos mais fracos em células BMSC, ADSC e Saos-2. O hPL promoveu o crescimento de células BMSC e ADSC mais vigorosamente do que o soro FFP e CS.

Conclusões: O soro FFP e CS pode ser produzido com trombina e CaCl ₂ rapidamente e de forma a poupar hemoderivados e funcionar como alternativas potentes ao FBS para o cultivo de células humanas.