SIgnacio Del-Valle, Adriana Casao, Rosaura Pérez-Pé, William V Holt, José A Cebrián-Pérez e Teresa Muiño-Blanco
Enquadramento: Uma das principais desvantagens do sémen refrigerado e descongelado é a peroxidação lipídica e a subsequente geração de espécies reativas de oxigénio a partir do metabolismo celular. Neste estudo, testámos a hipótese de que a utilização de compostos antioxidantes melhora a qualidade do esperma congelado-descongelado. Analisámos o efeito de diferentes antioxidantes, ou aditivos semelhantes a antioxidantes, nos processos envolvidos no arrefecimento e congelação-descongelação do sémen ovino. Métodos: A motilidade espermática, a integridade e estabilidade da membrana plasmática e o potencial de membrana mitocondrial (MMP) foram testados imediatamente após o descongelamento e após incubação durante 3 horas e 6 horas a 37°C. Resultados: A adição de ácido oleico/linoleico não melhorou a viabilidade espermática, embora tenha resultado num aumento da motilidade após refrigeração e reaquecimento, semelhante ao encontrado com o ácido pirúvico. Nas amostras congeladas-descongeladas, o efeito do ácido ascórbico 75 mM foi benéfico e melhorou a viabilidade, estabilidade da membrana, MMP e motilidade. O ácido pirúvico, a melatonina, a pinolina e a N-acetilcisteína, ou a combinação de certos antioxidantes, como os ácidos oleico/linoleico com o tocoferol, os ácidos lipóico e ascórbico, a melatonina e a pinolina, a N-acetilcisteína e o GSH não melhoraram significativamente a qualidade do esperma congelado. As amostras descongeladas suplementadas com lecitina obtiveram maior (p<0,001) valores de integridade e estabilidade da membrana e de MMP do que os controlos. No entanto, as alterações induzidas na membrana interna mitocondrial resultaram numa proporção muito baixa de mitocôndrias funcionais de forma dependente do tempo após o descongelamento. Estes efeitos prejudiciais foram evitados pelas proteínas plasmáticas seminais, que aumentaram o efeito protetor da lecitina. Conclusão: As proteínas plasmáticas seminais fortaleceram a capacidade crioprotetora da lecitina e não só a viabilidade espermática e a estabilidade da membrana foram bem mantidas, como a funcionalidade mitocondrial foi preservada. Significado geral: A lecitina juntamente com as proteínas do plasma seminal podem ser utilizadas como crioprotetores para o sémen de ovelha.