Tecnologia Genética

Abstrato

Regulação da expressão de VEGF-A em células endoteliais por ativação transcricional de genes ou silenciamento transcricional de genes: análise da ampla resposta transcricional do genoma

Tiia Husso, Mikko P. Turunen e Seppo Yla-Herttuala

O fator de crescimento endotelial vascular (VEGF-A) é um gene importante em muitas doenças, como o cancro e as doenças cardiovasculares. Investigámos alterações nos padrões de expressão genética em todo o genoma em células endoteliais murinas quando a expressão de VEGF-A foi modulada epigeneticamente utilizando pequenos RNAs em gancho (shRNAs) direcionados para o promotor. As células endoteliais murinas foram transduzidas com vetores lentivirais que expressam shRNAs que são complementares ao promotor do gene. Foram conduzidas experiências de matriz de expressão genética para investigar as alterações na expressão de mRNA em todo o genoma causadas pela regulação positiva e negativa do VEGF-A. Existiam várias centenas de genes expressos diferencialmente de acordo com os critérios estatísticos aplicados. Notámos que os efeitos da regulação negativa do VEGF-A foram muito mais generalizados do que os efeitos da regulação positiva do VEGF-A. A nossa análise in silico revelou que vários processos biológicos diferentes são alterados devido a efeitos epigenéticos na expressão do VEGF-A. Verificou-se que um dos principais reguladores da resposta transcricional mediada por VEGF-A é o fator de transcrição ATF-4. Este é o primeiro estudo que mostra a resposta transcricional à modificação epigenética da expressão de VEGF-A em células endoteliais. A regulação genética epigenética representa um mecanismo regulador natural dos genes e estes resultados revelam implicações anteriormente desconhecidas da regulação do VEGF-A nas células endoteliais.