Jornal de pesquisa e terapia com células-tronco

Abstrato

O recetor quinase AXL é modulado na diferenciação osteogénica de células estromais mesenquimais humanas em superfícies de implantes de titânio modificados

Mohammad Ramine Khan, Nikolaos Donos, Vehid Salih e Peter Mark Brett

Os implantes de titânio (Ti) com topografia micro-rugosa e elevada energia livre de superfície promovem a osteointegração, que as análises in vitro sugerem dever-se a uma nova melhoria na diferenciação e função osteogénica celular. O receptor tirosina quinase AXL (AXL) é expresso nas células estromais mesenquimais (MSCs) e está implicado com o seu ligante, específico para a paragem do crescimento 6 (GAS6), na regulação negativa da diferenciação osteogénica e pode ser modulado no aumento da diferenciação osteogénica das CTMs em superfícies de Ti modificadas. Esta hipótese foi testada cultivando CTMs humanos em superfícies de Ti de plástico de cultura de tecidos (TCP), polido (P), micro-áspero-hidrofóbico (SLA) e micro-áspero hidrofílico (modSLA) durante sete dias. Os níveis totais de RNA e proteína de AXL e GAS6 foram examinados por PCR em tempo real e ELISA, respetivamente. Os efeitos da desregulação da via de sinalização nas hMSCs com um agonista ou antagonista do recetor foram investigados através da análise da mineralização do cálcio e da síntese de marcadores osteoblásticos solúveis. Verificou-se que o regulamento da CTM tem níveis significativamente significativos no AXL e no GAS6 mais cedo em superfícies rugosas em comparação com superfícies lisas ao longo de sete dias. A adição do agonista do recetor provocou uma diminuição relativa da mineralização do cálcio que foi mais acentuada para o TCP em comparação com qualquer superfície de Ti. O antagonista não afetou a mineralização, mas provocou um aumento relativo dos níveis de proteína solúvel osteoblástica apenas nas superfícies rugosas. Os dados de expressão genética mostraram uma regulação positiva de RUNX2 e beta-catenina com o antagonista do recetor. Estes resultados sugerem que uma regulação negativa do AXL está correlacionada com o aumento da mineralização celular nas superfícies modificadas e que pode ser um biomarcador putativo para avaliar a eficácia clínica dos implantes endoósseos.