Jornal de Bacteriologia e Parasitologia

Abstrato

Detecção rápida de carbapenemases NDM, VIM, KPC e IMP por PCR em tempo real

Ewa Kosykowska, Tomasz Dzieciątkowski e Grażyna Młynarczyk

Carbapenêmicos são os beta-lactâmicos mais potentes, caracterizados por amplo espectro de atividade contra bactérias Gram-negativas e Gram-positivas. Infelizmente, a dispersão dinâmica da resistência a carbapenêmicos entre bactérias não fermentativas e Enterobacteriaceae é um problema crescente e pode levar a uma limitação perigosa de opções de tratamento. Entre três mecanismos diferentes de resistência, a produção de enzimas é de especial importância. Neste caso, apenas um pequeno gene é suficiente para expressar resistência a carbapenêmicos. Os genes da carbapenemase são frequentemente parte de integrons, que carregam diversas matrizes de cassetes de genes de resistência e apenas um evento de transferência é suficiente para disseminar resistência a múltiplos medicamentos. Além disso, os genes da carbapenemase são frequentemente localizados dentro de Elementos Genéticos Móveis. Por essas razões, as carbapenemases são as mais importantes epidemiologicamente. A detecção e identificação precoces de produtores de carbapenemase entre isolados clínicos podem evitar infecções nosocomiais. Desenvolvemos um ensaio multiplex de PCR em tempo real com base na tecnologia TaqMan para detecção e identificação rápida das carbapenemases mais comuns na Europa NDM, VIM, KPC e IMP. Foram testados 31 isolados de Enterobacteriaceae (n=15) e bacilares Gram-negativos não fermentativos (n=16), que adquirem carbapenemases NDM, VIM, KPC, IMP, GIM ou OXAs. Todo o experimento elaborado, incluindo isolamento de DNA e ciclagem de PCR, dura até 2 h.