Abstrato

Purificação e Caracterização de Aeromonas Media Klu 11.16 Quitosanase Isolada de Resíduos de Camarão

Ekowati Chasanah, Gintung Patantis, Dewi Seswita Zilda, Mahrus Ali e Yenny Risjani

O nosso estudo anterior descobriu que o KLU 11.16, isolado de resíduos de camarão, segregava enzimas quitinolíticas. A enzima bruta foi interessante porque o seu quitooligossacarídeo foi capaz de inibir algumas bactérias patogénicas. Neste estudo reportamos uma purificação e caracterização da enzima quitosanase produzida e a identificação do KLU 11.16. A purificação da enzima foi realizada em duas etapas por cromatografia de troca iónica seguida de filtração em gel. Dois dos 4 picos da etapa de Filtração em Gel, isto é, as frações 16 e 33, foram capazes de hidrolisar 100% de quitosana desacetilada, indicando que ambas as frações continham a enzima quitosanase. A enzima da fracção 16 tinha um peso molecular aproximado de 98,3 kDa. A enzima funcionou de forma ideal à temperatura de 300C e pH 6. A adição de iões Ca2+, Fe2+, K+, Na+ sob a forma de sal Cl2 e detergente Triton X-100 aumentou a atividade da enzima, enquanto os iões Co2+, Mn2+ e Zn2+ na mesma a concentração diminuiu a atividade da enzima. A adição de EDTA e SDS diminuiu significativamente a atividade enzimática. A identificação com base molecular revelou que o KLU 11.16 era 99% semelhante ao meio Aeromonas.

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