Diwu Yong-chang, Meng Ting-ting, Wang Fang, Gu Zan, Zeng Jian, Yang Ke, Cui Na e Gu Jie
Objetivo: Estudar os efeitos protetores do líquido cefalorraquidiano com a ingestão de decocção de Xixin (LCR) na apoptose induzida por Aß1-42 em neurônios do hipocampo de ratos.
Métodos: Neurônios hipocampais foram extraídos de ratos Wistar recém-nascidos e cultivados in vitro. Os neurônios cultivados foram divididos nos seguintes grupos: grupo controle normal, grupo modelo Aß, grupo de tratamento de baixa concentração, grupo de tratamento de média concentração e grupo de tratamento de alta concentração. Analisamos a viabilidade celular usando um ensaio MTT. A apoptose celular foi observada usando microscopia eletrônica de transmissão, e a taxa de apoptose celular foi medida com citometria de fluxo usando o kit de coloração dupla Annexin V/PI. Os níveis de expressão gênica e expressão proteica de Caspase-9, Bcl-2 e Bax nas células foram medidos usando técnicas de PCR em tempo real, Western blot e imunofluorescência.
Resultados: o fluido cerebrospinal com a ingestão de Xixin Decoction foi encontrado para melhorar a taxa de sobrevivência das células, melhorar a morfologia celular durante a apoptose e reduzir o número de células apoptóticas. Comparado com o grupo de controle, os níveis de expressão de Caspse-9 e Bax foram aumentados no grupo modelo, enquanto o nível de expressão de Bcl-2 foi diminuído. Além disso, os níveis de expressão de Caspase-9 e Bax foram encontrados para ser reduzidos em cada grupo de tratamento, comparado com o grupo modelo. Também foi bastante evidente que os níveis de expressão de Bcl-2 foram aumentados (P < 0,05 ou P < 0,01).
Conclusão: o fluido cerebrospinal com a ingestão de Xixin Decoction exibe um efeito protetor significativo nas células contra a apoptose induzida por Aß1-42. É importante ressaltar que demonstramos uma relação dose-efeito, com os efeitos do fluido cerebrospinal com a ingestão de Xixin Decoction em uma densidade de 20% mostrando os resultados mais significativos.