Bioquímica e Bioquímica Analítica

Abstrato

Produção, Purificação e Caracterização de Endopoligalacturonase por Bacillus subtillus

Nayab Munir, Javaid Asad M e Haidri SH

A parede celular vegetal é constituída por hidratos de carbono complexos como a celulose, hemiceluloses e pectina. A pectina é um hidrato de carbono complexo composto por unidades de ácido galacturónico ligadas por ligação glicosídica. Para a quebra deste microrganismo pectina são necessárias muitas enzimas diferentes. A poligalacturonase é uma hidrólise catalisada por enzimas pectinolíticas da ligação glicosídica α 1-4 em ácido poligalacturónico pela adição de água. A poligalacturonase tem dois tipos; endopoligalacturonase e exopoligalacturonase. A ligação glicosídica α 1-4 interna da catálise da endopoligalacturonase e a exopoligalacturonase catalisam a ligação glicosídica α 1-4 externa em moléculas de pectato . A endopoligalacturonase tem diversas aplicações, especialmente nas indústrias de sumos de fruta, utilizadas para a clarificação de sumos, bem como na indústria alimentar para a maceração de vegetais. O endo-PG produzido por fungos funciona a pH ácido e a baixa temperatura, mas a aplicação do endo-PG na indústria alimentar e na indústria têxtil necessita de uma enzima que funcione a alta temperatura e também em condições alcalinas. O Bacillus subtillus foi utilizado como estirpe de referência. Utilizando diferentes substratos como cascas de maçã, cascas de rabanete e cascas de citrinos, concluiu-se que as cascas de citrinos produzem uma concentração máxima de enzimas. A caracterização adicional mostrou que o EPG produzido por Bacillus subtillus tem uma temperatura ótima de 60°C e um pH ótimo 5. A dobra máxima de purificação foi observada com filtração em gel. O peso molecular da enzima foi de 67 kDa. O Vmax para o EPG produzido por Bacillus subtillus foi de 1,21 mg/ml e o Km foi de 2.423 mol/min/mg.