Jornal de tecnologia microbiana e bioquímica

Abstrato

Avaliação preliminar da deteção de Mycobacterium tuberculosis em cultura e expetoração artificial utilizando membrana BioNanoPore e PCR em tempo real

James V. Rogers e o jovem W. Choi

A rápida deteção e diagnóstico do Mycobacterium tuberculosis é fundamental para avaliar a gravidade da doença,
a eficácia dos tratamentos e terapêuticas e a monitorização da saúde pública. Este estudo avaliou uma tecnologia BioNanoPore (ágar BNP™ Middlebrook) para detetar e quantificar o M. tuberculosis em menos tempo do que os métodos tradicionais de contagem em placa. O BNP™ Middlebrook permitiu a deteção visual de M. tuberculosis em culturas em crescimento ativo e inoculou expetoração artificial em 5 dias; no entanto, as colónias não eram visíveis no ágar Middlebrook 7H10. Para culturas incubadas na presença ou ausência de expetoração artificial durante 19 dias em BNP™ Middlebrook, o M. tuberculosis variou entre 5,81-5,86 log10CFU/mL em cultura líquida e 6,39-6,50 log10CFU/mL em expetoração artificial ; as contagens de M. tuberculosis em cultura líquida variaram entre 5,70-5,85 log10CFU/mL em Middlebrook 7H10. Todas as colónias de culturas com 19 dias de idade avaliadas nos meios BNP™ Middlebrook e Middlebrook 7H10 foram positivas para a sequência de inserção de Mycobacterium (IS) 6110 por PCR em tempo real. Este estudo demonstra que o BNP™ Middlebrook consegue detetar o M. tuberculosis mais rapidamente do que as técnicas de plaqueamento padrão na presença ou ausência de uma matriz biológica simulada (expectoração artificial). Além disso, a etapa de desenvolvimento da cor BNP™ Middlebrook não interfere com a deteção por PCR em tempo real do IS 6110. Este estudo fornece uma avaliação preliminar da utilização potencial do BNP™ Middlebrook para um rastreio e deteção mais rápidos de M. tuberculosis viável no que respeita à avaliação de amostras clínicas,
tratamento terapêutico/eficácia da vacina ou vigilância epidemiológica.