Patrick C Baer, Jürgen M Overath, Anja Urbschat, Ralf Schubert e Helmut Geiger
Objectivo: A terapia baseada em células estaminais parece ser uma opção promissora para apoiar a regeneração após falência de órgãos e lesão tecidular. O transplante de CTM requer células com capacidade regenerativa máxima. Por conseguinte, a investigação sobre novas estratégias para melhorar a libertação de factores regenerativos das CTM é urgentemente necessária.
Métodos: Células estromais/tronco (ASC) derivadas do tecido adiposo humano foram isoladas a partir de lipoaspirados, caracterizadas e cultivadas. As células foram cultivadas em condições padrão ou pré-condicionadas por incubação em ambiente hipóxico (0,5% O2) ou em normóxia na presença de fator de necrose tumoral humano recombinante-α (TNFα) ou fator de crescimento epidérmico humano recombinante (EGF) durante 48 horas. Em primeiro lugar, sete fatores promotores de regeneração selecionados foram avaliados por análise qPCR. Posteriormente, o secretoma das ASCs foi estimado utilizando um array de proteínas comercialmente disponível para 507 proteínas.
Resultados: A análise de PCR mostrou uma indução diferencial da expressão génica das ASCs pelos três pré-tratamentos. Enquanto as ASCs em hipoxia mostraram uma indução significativa de mRNA de VEGF, FGF-7 e IGF-II, os outros pré-tratamentos não induziram alterações significativas na expressão de VEGF. A expressão génica de HB-EGF e M-CSF foi significativamente induzida em hipoxia e por incubação com TNFα, mas não com EGF. O ARNm 1 semelhante à angiopoietina não foi significativamente induzido por todos os três regimes de pré-condicionamento. A avaliação pelo array de proteínas revelou que das 507 proteínas investigadas, 21,9% apresentaram um aumento superior a cinco vezes após a incubação em hipoxia (111 em 507 proteínas). A pré-incubação com EGF resultou numa regulação positiva de 32,3% (164/507), enquanto o TNFα regulou positivamente 28,8% de todas as proteínas avaliadas (146/507).
Conclusão: Os resultados indicam que todos os três regimes de pré-condicionamento induziram uma grande variedade de proteínas. No entanto, o pré-tratamento a curto prazo com EGF induziu a maior quantidade de proteínas e, portanto, parece ser o melhor regime de pré-condicionamento para abordagens terapêuticas celulares.