Jornal de Pesquisa e Desenvolvimento em Aquicultura

Abstrato

Perfil de polipeptídeos da fração de proteína de globulina sérica do peixe-gato pangas (Pangasius pangasius) e desenvolvimento de imunoconjugado de globulina sérica anti-pangas-HRPO para detecção rápida de infecção bacteriana

Harresh Adikesavaliu, Pradipta Paul, Siddhartha N Joardar e Jawahar T Abraham

Doenças bacterianas continuam sendo um fator econômico importante para a criação comercial de bagres. O diagnóstico correto de doenças é, portanto, importante para medidas de tratamento eficazes e para evitar perdas de produção. O presente estudo teve como objetivo fracionar e caracterizar as proteínas globulinas séricas do bagre pangas, Pangasius pangasius, por fracionamento de sal e análise SDS-PAGE. O perfil proteico das proteínas globulinas séricas fracionadas de P. pangasius revelou um total de 12 bandas, a saber, 136,64, 120,58, 95,87, 79,92, 72,67, 63,04, 45,99, 43,32, 38,65, 34,82, 28,46 e 19,08 kDa. O imunoconjugado anti-globulina sérica pangas (ASG) peroxidase de rábano (HRPO) (imunoconjugado ASGHRPO) foi preparado seguindo o procedimento de periodato de sódio e aumentando o soro imune contra ele em coelhos. A soro-reatividade do imunoconjugado ASG-HRPO foi avaliada por dot-ELISA e ELISA direto. No dot-ELISA, o desenvolvimento de manchas de cor intensas foi observado apenas quando o imunoconjugado ASG-HRPO foi usado em diluição pura ou 1:10. Da mesma forma, os resultados do ELISA direto mostraram baixa soro-reatividade com um valor de título de diluição <200 contra a fração de proteína globulina sérica pangas como antígeno . O dot-ELISA também foi realizado para detectar a presença de anticorpos específicos contra Aeromonas hydrophila e Edwardsiella tarda em P. pangasius separadamente por inoculação experimental. O desenvolvimento de manchas de cor intensas foi observado em ambos os casos, o que por sua vez indicou a especificidade do imunoconjugado ASG-HRPO na detecção de anticorpos anti-A. hydrophila e anti-E. tarda no soro de P. pangasius. O desenvolvimento de manchas coloridas após a adição de soro imune de peixe sensibilizado e incubação sugeriu que o imunoconjugado ASG-HRPO pode ser usado para o soromonitoramento de anticorpos específicos e sorodiagnóstico de doenças causadas por E. tarda e A. hydrophila.