Jornal de tecnologia microbiana e bioquímica

Abstrato

Síntese de Polihidroxialcanoato por Escherichia coli Recombinante JM109 Expressando Genes de Biossíntese de PHA de Comamonas sp. EB172

Lian-Ngit Yee, Tabassum Mumtaz, Mitra Mohammadi, Lai-Yee Phang, Yoshito Ando, ​​Abdul Rahim Raha, Kumar Sudesh, Hidayah Ariffin, Mohd Ali Hassan e Mohd Rafein Zakaria

Escherichia coli recombinante JM109 albergando o gene de biossíntese de polihidroxialcanoato (PHA) (phaCABco) de Comamonas sp. O EB172, um micróbio tolerante a ácidos, foi examinado quanto à produção de PHAs a partir de várias fontes de carbono. O estudo demonstrou que a E. coli JM109 recombinante tinha potencial para utilizar fontes de carbono à base de açúcar e ácido, para a biossíntese de poli(3-hidroxibutirato) P(3HB) e poli(3-hidroxibutirato-co-3 -hidroxivalerato ) copolímeros P(3HB-co-3HV). Nas experiências em frasco agitado, a estirpe foi capaz de produzir copolímero P (3HB-co-3HV) a partir de ácidos orgânicos mistos, e foram obtidas produtividades mais elevadas utilizando glicose em comparação com ácidos mistos. No entanto, a acumulação de PHA foi semelhante, independentemente da fonte de carbono utilizada. Verificou-se que a suplementação de azoto no meio melhorou o peso seco das células, mas afetou negativamente a formação de 3HV na produção de copolímeros. O monómero máximo de 3HV (3 mol%) foi obtido com C/N 42,1, utilizando ácidos mistos como fonte de carbono. No biorreator de 2L, a produtividade e o rendimento com base no coeficiente de utilização do substrato foram de 0,16 g PHA/(Lh) e 0,41 g PHA/g substrato sob C/N de cerca de 75, utilizando 20 g /L de glicose e 0,5 g/L sulfato de amónio, respetivamente. O polímero produzido pela estirpe recombinante tinha um peso molecular na gama de 8,5 x 105 a 1,4 x 106 Da. No geral, a capacidade da E. coli JM109 recombinante de utilizar glicose e ácidos mistos alargou a sua seleção de substrato para fermentação, incluindo a oportunidade de utilizar biomassa renovável.