Madhu Dhar, Lisa Amelse, Nancy Neilsen, Pelagie Favi e Jessica Carter-Arnold
Justificação: As células estaminais mesenquimais equinas (eMSCs) e o plasma rico em plaquetas (PRP) são terapias baseadas em células utilizadas clinicamente para reparar tecidos danificados de cavalos. Numerosos relatórios, incluindo dados do nosso laboratório, mostram que existem variações nas propriedades biológicas das CTM e do plasma rico em plaquetas, que podem afetar as suas funções biológicas. Um único estudo descreve a utilização de eMSCs e PRP na cicatrização de tendões, com sucesso mínimo. O mecanismo de ação exato utilizando a combinação das duas terapêuticas é desconhecido. Este estudo foi realizado para avaliar e compreender os efeitos do PRP, caso existam, no desempenho celular das eBMMSCs em cultura.
Objectivo: Avaliar os efeitos do PRP in vitro na taxa de proliferação, expressão de marcadores proteicos e diferenciação osteogénica e condrogénica das culturas primárias de eBMMSCs.
Métodos e Resultados: Foi utilizado um kit portátil disponível comercialmente para isolar o PRP. Para investigar o efeito do PRP nas eBMMSCs, a taxa de proliferação das eBMMSCs foi medida através do ensaio MTS e, posteriormente, a viabilidade e o stemness das eBMMSCs foram avaliadas através da coloração fluorescente e da expressão de CD90. Por fim, a diferenciação osteogénica e condrogénica das eBMMSCs foi avaliada por coloração específica de linhagem e pelas expressões de mRNA específicos de linhagem. Todos os ensaios foram realizados a uma concentração de 50 milhões de plaquetas/mL. Foi observado um aumento significativo da proliferação e dos perfis de diferenciação na presença de PRP. Mais importante ainda, as características das células estaminais das eBMMSCs inferiores mostraram uma melhoria acentuada na presença de PRP.
Conclusões: A adição de PRP melhora a função in vitro das eBMMSCs, aumentando a proliferação e a osteo e condrogénese. A presença de uma dose ótima de plaquetas pode melhorar o desempenho in vivo das eBMMSCs e pode estar indicada quando se utiliza terapia com eBMMSCs autólogas na clínica.