Tecnologia Genética

Abstrato

Caracterização fenotípica e genotípica de Carnobacterium divergens isolada de carne de bovino crua picada tunisina refrigerada

Thouraya Mokrani, Ines Essid, Mnasser Hassouna, Lachheb Jihene, Ghram Abdeljalil e Ahlem Jouini

Seis estirpes psicotrópicas de Carnobacterium divergens foram isoladas a partir de carne de bovino crua picada da Tunísia, embalada e armazenada a 6°C. Foram identificados pela primeira vez por métodos bioquímicos. Utilização de reações bioquímicas e fermentação de hidratos de carbono antes da sua caracterização por técnicas moleculares. A estirpe de Carnobacterium divergens é um bastonete psicotrópico Gram-positivo, imóvel, que não possui catalase, oxidase e manitol. Cresce a pH 9,1 (ágar D-MRS), mas não em ágar acetato (pH ≤ 5,4). Para todos estes isolados, a identificação fenotípica, utilizando o sistema API 50 CHL, revelou uma variabilidade nas capacidades fermentativas de alguns açúcares (glicerol, amigdalina, arbutina, D-trealose e gluconato de potássio). Foram utilizados iniciadores de reação em cadeia da polimerase (PCR) específicos da espécie para garantir a identificação destas estirpes isoladas ao nível da espécie. Além disso, a sequenciação do gene 16S rRNA confirmou que todos os seis isolados são identificados como C. divergens. A técnica Rep-PCR foi realizada para investigar a diversidade intraespecífica dentro destas seis estirpes de C. divergens, comummente identificadas em carne. O método Rep-PCR distinguiu as estirpes de C. divergens, demonstrando a sua biodiversidade e as suas evidentes semelhanças. Os primers BOX e REP permitiram a amplificação com 85% e 80% de similaridade entre estirpes, respetivamente. Os iniciadores BOXA1R e REP mostraram ser úteis para a diferenciação de estirpes de C. divergens.