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Abstrato
Otimização do protocolo RAPD-PCR para o rastreio de Jatropha Curcas e Gossypium Hirsutum cultivados em solo contaminado com metal
Narayanan Mathiyazhagan e Devarajan Natarajan
A otimização do protocolo de reação em cadeia da polimerase DNA polimórfica amplificada aleatoriamente (RAPD-PCR) foi realizada para o rastreio de duas plantas (Jatropha curcas & Gossypium hirsutum) cultivadas em solos contaminados com metal. Foi empregue um método CTAB para a extração de ADN, mas um tratamento noturno com RNase foi realizado para eliminar os contaminantes de RNA. O DNA isolado foi utilizado para a amplificação por RAPD-PCR. A condição ideal para uma amplificação fiável requer uma concentração mais elevada de MgCl 2 (3 mM), primer (2,5 μM), Taq DNA polimerase (1 unidade) e 3 μl de DNA modelo (amostra) e uma temperatura de recozimento de 55°C. Foram observados produtos amplificados reprodutíveis nestas condições para ambas as espécies de plantas.