Abstrato

Sobre a geração de metodologias eficientes para triagem de toxicidade baseada em células por meio de análise e otimização de protocolos comparativos

Sepideh Abolpour Mofrad, Katharina Kuenzel, Oliver Friedrich e Daniel F Gilbert

Em biologia celular em geral e em abordagens de triagem baseadas em células de alto rendimento em particular - por exemplo, para avaliação de toxicidade baseada em vitro - várias metodologias ou protocolos são relatados na literatura. No caso de um ensaio de triagem baseado em células, para avaliação de toxicidade ou para avaliar outra questão biológica, ser estabelecido pela primeira vez em um laboratório de pesquisa, o pesquisador tem que selecionar uma série de protocolos diferentes da literatura e criar um protocolo otimizado para o uso pretendido. Isso é normalmente necessário, porque protocolos otimizados, gerados após análise e otimização de protocolo comparativa, raramente estão disponíveis. Em outro estudo, ao qual nos referimos como uma vitrine, conduzimos uma análise comparativa de três protocolos diferentes para diferenciação de células NT2 neuronais, disponíveis na literatura. A partir dessa comparação, geramos um método aprimorado e otimizado, permitindo a diferenciação de NT2 neuronal em culturas de monocamada com alto rendimento de células NT2-N, permitindo triagem primária sistemática baseada em vitro para tóxicos de desenvolvimento e neurotóxicos em diferentes estágios de maturação. Neste comentário, para evitar que os mesmos experimentos sejam conduzidos repetidamente em diferentes laboratórios ao redor do mundo e em momentos diferentes, sugerimos a geração de métodos avançados e eficientes por meio de análise e otimização de protocolos comparativos, para aplicação em uma variedade de campos de pesquisa relacionados à biologia celular e de células individuais.

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