Jornal de pesquisa e terapia com células-tronco

Abstrato

Sem deteção de risco potencial de cancro para neurónios dopaminérgicos derivados de células estaminais reprogramadas de vírus livres de fibroblastos de ratinhos adultos

Liu G.

Objectivo: A terapia de substituição de células estaminais através da reprogramação de células somáticas é uma terapia prospetiva significativa para doenças neurodegenerativas e medicina personalizada. Uma vez que os genes de reprogramação portadores de vírus conferem um risco considerável para a formação de tumores, as abordagens atuais tendem a substituir o padrão viral por um sistema não viral. Contudo, ainda existe grande preocupação quanto às propriedades oncogénicas destes genes reprogramadores. Actualmente, nenhuma evidência directa pode verificar que os sistemas não virais não influenciam a integração do ADN genómico e os eventos de mutagénese nos produtos finais após a reprogramação.
Métodos: Avaliámos o risco potencial de cancro de neurónios dopaminérgicos reprogramados derivados de células estaminais utilizando um vetor não viral exclusivo contendo quatro genes de reprogramação. Os neurónios dopaminérgicos derivados de células estaminais reprogramados foram os produtos finais após 50 dias de cultura celular de fibroblastos de ratinhos adultos. Após 6 meses de cultura, estas células foram avaliadas quanto ao risco de cancro.
Resultados: As avaliações gerais do risco de cancro foram examinadas pela primeira vez utilizando múltiplos biomarcadores de células estaminais. Não detetámos nenhuma sobreexpressão destes biomarcadores. Além disso, avaliámos se os fatores de neurotransmissão mais importantes foram ou não expressos após 6 meses em cultura celular em massa. Os nossos resultados determinaram que apenas foi detetada a expressão génica robusta da tirosina hidroxilase (TH), como enzima limitante da taxa na síntese de dopamina. Além disso, o produto final dos neurónios dopaminérgicos TH-positivos foi confirmado pela sequenciação do ADN genómico do TH. Os nossos dados sugeriram que nenhum dos quatro genes de reprogramação se integrou no ADN genómico da célula hospedeira e que nenhum outro evento de mutagénese ocorreu após a sequenciação genética do ADN genómico de TH relacionado com 13 exons codificantes completos com regiões parciais não traduzidas de duas extremidades.
Conclusão: Os neurónios dopaminérgicos reprogramados derivados de fibroblastos de ratinhos adultos têm-se revelado uma tecnologia e abordagem segura como uma potencial terapia para doenças neurodegenerativas.