Jornal de Pesquisa e Desenvolvimento em Aquicultura

Abstrato

A via de sinalização keap1a/Nrf2 ativada por nitazoxanida é regulada por Cul3 de Criataria plicata

Wuting Lu, Feixiang Su, Fanhua Yang, Jinhua An, Baoqing Hu, Shaoqing Jian, Gang Yang*, Chungen Wen*

Cul3 regula a ubiquitinação e degradação de Nrf2 na via Nrf2/keap1a em condições normais. Em invertebrados aquáticos, o mecanismo relacionado de ativação do estresse oxidativo em mexilhões foi estudado estimulando Cristatra plicata com Nitazoxanida (NTZ). O gene Cul3 de comprimento total de C. plicata , designado CpCul3, foi clonado. A análise de sequência comparativa do gene CpCul3 e seus genes homólogos mostrou que o gene CpCul3 era altamente semelhante aos genes homólogos de outras espécies na sequência de aminoácidos. A sequência de aminoácidos de CpCul3 é 78%-98% semelhante à de outros invertebrados. Na árvore filogenética, o gene CpCul3 é mais intimamente relacionado ao gene Cul3 em outros bivalves. Após a estimulação com NTZ, o nível de expressão do mRNA CpCul3 aumentou no hepatopâncreas de C. plicata . O nível de expressão proteica de CpCul3 foi detectado utilizando anticorpo específico de CpCul3 , e o nível de expressão também aumentou. Os resultados da localização subcelular de CpCul3 em HEK293T indicaram que CpCul3 poderia co-localizar com mitocôndrias, lisossomos e retículo endoplasmático, e a colocalização com mitocôndrias é mais óbvia. Os resultados indicaram que CpCul3 pode desempenhar um papel importante na regulação do estresse oxidativo. O experimento CoIP provou que CpCul3 poderia promover a degradação da ubiquitinação de CpNrf2. Por fim, CpNrf2 poderia ser degradado pela ubiquitinação mediada por K48.