Jornal de pesquisa e terapia com células-tronco

Abstrato

Fibroblastos embrionários de ratinho adquirem potencial de sarcomagénese após diferenciação em células produtoras de insulina

Gupta A, Kurtovic S, Ng TT, Tsuyoshi T, Narwani K, Biancotti JC, Spurka L, Funari V, Balzer B, Talavera-Adame D e Dafoe DC

Uma fonte abundante de células produtoras de insulina aumentaria o sucesso do transplante de ilhotas para o tratamento da diabetes. As células produtoras de insulina podem ser derivadas de fibroblastos humanos que adquiriram um fenótipo de células estaminais mesenquimais (MSC). No entanto, estas CTM são capazes de dar origem a sarcomas após a transformação. O nosso objetivo foi investigar se os fibroblastos embrionários de ratinho (MEF) adquirem potencial de sarcomagénese após se diferenciarem em células produtoras de insulina. Derivamos células produtoras de insulina a partir de uma linha celular MEF MMMbz. Após diferenciação, as células foram marcadas com proteína verde fluorescente (GFP) conduzida por promotor de insulina de rato (INS-GFP) para isolamento, expansão e caracterização celular por imunocitoquímica (ICC), RT-PCR quantitativo (qRT-PCR) e microarranjos genéticos . Estas células foram depois triadas por FACS e transplantadas sob a cápsula renal de ratinhos SCID para avaliar o comportamento celular. As células enxertadas foram analisadas por IHQ. O MMMbz expressou o recetor alfa do fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGFR-α) e a nestina. Após a diferenciação, foi encontrada uma maior expressão de marcadores de células beta nas células classificadas em comparação com as células não classificadas. O microarranjo genético corroborou a expressão de marcadores pancreáticos e mesenquimais juntamente com a ativação de vias cancerígenas. No prazo de 30 dias após o transplante, todos os ratinhos enxertados desenvolveram sarcomas indiferenciados que prejudicaram avaliações adicionais da função das células produtoras de insulina. Portanto, as linhas celulares produtoras de insulina podem ser derivadas in vitro de fibroblastos embrionários de ratinhos que se comportam como CTM, mas o potencial de sarcomagénese pode ser conferido por uma subpopulação de células transformadas.