Bioquímica e Bioquímica Analítica

Abstrato

A diferenciação celular semelhante a monócitos / macrófagos induzida por TPA em células HL60 leva à perda de acetilação da histona H4 lisina 16

Rahul Kumar Vempati

O 12-O-Tetradecanoilforbol-13-acetato (TPA) é um éster de forbol e induz a diferenciação celular semelhante a monócitos/macrófagos em células HL60. Os níveis e padrões de expressão genética diferem muito entre as células HL60 diferenciadas e indiferenciadas. As modificações epigenéticas das histonas desempenham um papel crucial na ativação transcricional e as alterações nos níveis de modificação afetam grandemente o padrão de expressão genética. A acetilação da Histona H4 Lisina 16 (H4K16ac) é uma dessas modificações e tem um papel significativo na ativação transcricional. As alterações no seu nível de acetilação devido a um efeito fisiológico ou patológico terão um efeito dramático na expressão genética celular. Aqui, foi feito um estudo para ver o efeito da diferenciação induzida por TPA nos níveis de H4K16ac em células HL60. Os resultados obtidos a partir da análise citométrica de fluxo mostraram expressão do marcador de superfície celular de macrófagos CD11b em células HL60 diferenciadas com TPA e os western blots revelaram uma regulação negativa drástica de H4K16ac em células diferenciadas. O ensaio de imunotransferência e co-imunoprecipitação revelou um aumento dependente de danos no ADN da acetilação de H4K16 e a sua co-localização com γH2AX em células indiferenciadas. Considerando que as células diferenciadas com TPA (CD11B+ve) não apresentaram qualquer aumento dos níveis de acetilação da H4K16 na presença de danos no ADN. O presente estudo mostra que a diferenciação induzida por TPA de células HL60 em macrófagos leva à regulação negativa da acetilação de H4K16.