Teresa Lopes da Silva, Daniela Feijão e Alberto Reis
A citometria de fluxo multiparâmetro foi utilizada para monitorizar a resposta ao stress de R. glutinis durante uma fermentação em batelada alimentada, através da viabilidade celular, conteúdo lipídico e dispersão de luz intrínseca. Durante a fermentação da levedura, a proporção de células com membrana permeabilizada (células mortas) aumentou quando os nutrientes e/ou o oxigénio se tornaram limitantes. As células de levedura mostraram um nível de lesão mais elevado quando cultivadas sob outras limitações de nutrientes do que sob condições de limitação de oxigénio, uma vez que as células mortas reduziram o seu conteúdo interno e tamanho na situação anterior, sugerindo lise drástica das células.
O teor máximo de lípidos na levedura foi de 8% (p/p) a t=38,3 h. Este baixo teor de lípidos foi atribuído à limitação de oxigénio, o que realça a importância da taxa de transferência de oxigénio na produção de lípidos a partir de culturas de leveduras aeróbias.
Foram detetadas alterações nos sinais de luz de dispersão direta e lateral durante o crescimento da levedura, o que pode fornecer uma forma útil e rápida de identificar a fase de crescimento da levedura.
A abordagem multiparâmetros aqui relatada representa um melhor sistema de controlo baseado no nível de célula individual que pode ser utilizado para a otimização do desempenho do bioprocesso de levedura e também pode ser utilizado para a triagem rápida de estirpes de levedura para a produção de óleo de célula única.