Jornal de pesquisa e terapia com células-tronco

Abstrato

Integração de vetores lentivirais de miRNA e eficácia de direcionamento genético em progenitores cardíacos

Mariana Loperfido, Stefania Crippa e Maurílio Sampaolesi

As células estaminais e progenitoras cardíacas são um desafio para uma possível aplicação da terapia celular. Vários laboratórios de investigação estão a explorar a viabilidade da abordagem da terapia celular autóloga para eliminar os tratamentos imunossupressores responsáveis ​​por efeitos secundários indesejáveis. Recentemente, mostrámos que progenitores cardíacos isolados de ratinhos nulos para Sgcb, modelo animal de distrofia muscular das cinturas tipo 2E, sofrem uma diferenciação aberrante in vitro e in vivo devido à desregulação do miR669. Esta família de miRNA é capaz de inibir o programa miogénico esquelético ao visar diretamente o MyoD 3’ UTR. Utilizando tecnologia lentiviral, fornecemos evidências de que é possível resgatar o fenótipo distrófico aberrante pela sobreexpressão do miRNA669 sem correção genética. No entanto, não foi analisado como os vírus que transportam os miRNAs foram posicionados no genoma após a transdução e como o seu local de localização poderia influenciar o potencial de resgate. Aqui investigamos o perfil de integração do vetor lentiviral que transporta o pré-miR669 em populações policlonais e clonais infetadas derivadas de progenitores cardíacos Sgcb. O nosso estudo revela que os locais de inserção retroviral (RIS) estão amplamente restritos aos genes codificadores (65%). Embora com a limitação da nossa análise, não tenhamos encontrado resultados para genes relacionados com o cancro e vários RIS sequenciados trouxeram à luz genes envolvidos principalmente na função muscular. Assim, os nossos dados mostram que o perfil de inserção do vetor lentiviral é específico da célula, no entanto, o estado da cromatina das células alvo influencia positivamente as integrações virais.