Jornal de pesquisa e terapia com células-tronco

Abstrato

Os ratinhos deficientes em Rap1A GTPase exibem uma adesão reduzida de células estromais hematopoiéticas e mesenquimais, mas um potencial de repovoamento hematopoiético intacto

Erika Fleck, Stephan Göttig, Harald Kropshofer, Juliane Steinmann, Annette Dorn, Brigitte Rüster, Erhard Seifried, Jürgen Scheele e Reinhard Henschler

Enquadramento: A Guanina Trifosfatase (GTPase) Rap1A tem sido implicada na proliferação e migração celular em diferentes tecidos. O seu papel na produção, adesão e migração de células hematopoiéticas derivadas da medula óssea é, no entanto, compreendido de forma incompleta. Métodos: Analisámos ratinhos sem um ou ambos os alelos Rap1A e medimos a sua função de adesão e a sua capacidade de repovoamento hematopoiético através de transplante competitivo de medula óssea no modelo de transplante CD45.1/CD45.2. Empregamos ainda citometria de fluxo e ensaios de adesão de câmaras de fluxo dependentes da tensão de cisalhamento para caracterização fenotípica e análise das funções de adesão. Resultados: Os ratinhos Rap1A-/- apresentaram uma diminuição do número de linfócitos e progenitores formadores de colónias hematopoiéticas no sangue, enquanto os números de granulócitos, monócitos ou plaquetas não foram significativamente alterados em comparação com os controlos. A adesão induzida pela quimiocina CXCL12 de células de medula óssea depletadas de marcadores de linhagem (Lin-) à Molécula de Adesão Celular Vascular (VCAM) -1 e à Molécula de Adesão Intercelular (ICAM) -1 foi significativamente reduzida nos ratinhos Rap1A-/ -. No entanto, o repovoamento competitivo por células de medula óssea deficientes em Rap1A não foi inferior à medula óssea de tipo selvagem 9 meses após o transplante. Não foi observado crescimento de células estromais mesenquimais (MSCs) na medula óssea de ratinhos Rap1A-/-, enquanto as MSCs Rap1A+/- exibiram uma expressão reduzida de moléculas de adesão envolvidas no direcionamento de progenitores e uma adesão prejudicada a células endoteliais primárias e VCAM-1 sob stress de cisalhamento in vitro, em comparação com as suas congéneres do tipo selvagem. Conclusões: O Rap1A regula a adesão de células hematopoiéticas imaturas e células estromais mesenquimais, mas parece ser redundante para enxerto hematopoiético.