Jornal de pesquisa e terapia com células-tronco

Abstrato

A existência a longo prazo de células estaminais derivadas do tecido adiposo do dador no recetor pode modular a sobrevivência do alotransplante de tecido composto vascularizado num modelo de roedores

Chien-Chang Chen, Shigeru Goto, Chia-Chun Tsai e Yur-Ren Kuo

Os nossos estudos anteriores demonstraram que as células estaminais derivadas do tecido adiposo (ASCs) do dador combinadas com terapia imunossupressora de curto prazo poderiam prolongar a sobrevivência do alotransplante de tecido composto vascularizado (VCA) num modelo de membro posterior de roedor. Neste estudo, investigámos se o retorno e a migração dos ASC doadores podem modular a sobrevivência do VCA. Foram realizados transplantes ortotópicos de membros posteriores de ratos machos Wistar para Lewis (dia 0). As ASCs doadoras foram propagadas a partir do tecido adiposo e da subcultura originária de ratos Wistar transgénicos com proteína fluorescente verde (GFP). O rato transplantado (Lewis GFP-negativo) recebeu o protocolo imunossupressor semelhante ao nosso projeto anterior, incluindo ciclosporina-A de curta duração (CsA, dias 0-+20), soro anti-linfócito (ALS; 0,5 ml ip; - 4, + 1) e três rondas de GFP+-ASCs (2 × 106 células/tempo, iv nos dias +1, +7 e +21). A avaliação do enxerto de vários tecidos doadores e recetores foi realizada através de coloração imunofluorescente. A citometria de fluxo foi realizada para quantificar os GFP+-ASCs. Os resultados revelaram que a sobrevivência do alotransplante foi significativamente prolongada (> 100 dias) exclusivamente no grupo ASC-ALS-CsA, o que foi bem correlacionado com a existência a longo prazo de ASCs positivas para GFP do dador no recetor. A análise citométrica de fluxo também revelou expressão aparente de GFP + -ASCs no sangue periférico do recetor às 2 semanas após a infusão de ASC, mas a inclinação diminuiu pós-transplante. A coloração imunofluorescente realizada em amostras de biópsia de tecido revelou que as células positivas para GFP existiam na aloskin e na pele do recetor e nos tecidos parenquimatosos do fígado e baço 2 semanas após a injeção de ASC. No entanto, não foram encontradas expressões aparentes de GFP+-ASCs nos tecidos recetores 16 semanas após o transplante, exceto no parênquima do baço recetor. Estas ASC do dador indicadas existiam há muito tempo no tecido do baço recetor e o sangue circulante pode levar a prolongar a sobrevivência do aloenxerto.