Jornal de pesquisa e terapia com células-tronco

Abstrato

Expansão clínica em larga escala de células estaminais mesenquimais no sistema de expansão celular automatizado aberto Quantum®, compatível com GMP: comparação com a expansão em frascos T tradicionais

Chantal Lechanteur, Stefano Baila, Michiel Etienne Janssens, Olivier Giet, Alexandra Briquet, Etienne Baudoux e Yves Beguin

Objectivos: Foram avanços avançados no conhecimento das propriedades imunorreguladoras das células estaminais mesenquimais (CTM). Atualmente estamos envolvidos em vários protocolos clínicos que avaliam estas propriedades em diferentes ambientes, incluindo células hematopoiéticas ou transplante de órgãos sólidos e doenças autoimunes graves ou refratárias. Considerando o grande número de células expandidas ex-vivo para estes protocolos clínicos (uma dose de MSC varia entre 1 a 4x10-6 MSC/kg doente por infusão), avaliámos o dispositivo Quantum®, um biorreator de fibras ocas automatizado, funcionalmente fechado e compatível com o sistema GMP e comparado com o nosso sistema tradicional de cultura clínica em frascos. Métodos: As expansões de CTM primárias e pré-enriquecidas foram conduzidas simultaneamente em ambos os sistemas de cultura e avaliadas em termos de taxas de expansão e conformidade com as especificações de qualidade e critérios de libertação do ISCT. Devido a considerações práticas, a maioria das experiências realizadas no biorreator (expansões P1 e P2) utilizaram MSC descongelados. Estas foram comparadas com expansões de MSC frescas e descongeladas em frascos. Resultados: O dispositivo Quantum® produzido de forma reprodutível doses terapêuticas de CTM que cumprem os requisitos de libertação do ISCT, são estereis, desprovidas de micoplasma e endotoxina, possuem cariótipos normais e demonstram capacidades imunossupressoras e de diferenciação in vitro. As células também cresceram mais rapidamente no biorreator do que nos frascos durante a passagem P1 (duplicação do tempo 40 em comparação com 56 horas nos frascos) e expansões P2, mas não durante a fase de expansão primária (P0). A sementeira de 20x10-6 células pré-selecionadas P2 descongeladas no dispositivo permitiu-nos colher 110-276x10-6 MSC após uma expansão de 7 dias; sementeira de 50x10-6 células testadas em 291-334x10-6 CTM colhidas. Conclusão: Concluindo, o dispositivo Quantum® é um excelente sistema para produzir uma dose clínica de MSC, mas o custo-benefício varia em função da estratégia de tecido inovador. Para a nossa situação específica, a utilização do dispositivo Quantum não resultou numa solução de redução de custos.