Jornal de pesquisa e terapia com células-tronco

Abstrato

Isolamento e caracterização de células estaminais de disco espinal adulto de tecidos de disco espinal humano saudável

Christopher Duntsch, Erika Dillard e Umar Akbar

Este relatório detalha o isolamento, cultura e caracterização de células estaminais do disco espinal derivadas de amostras de tecido do disco espinal adulto humano. Utilizando métodos de cultura de suspensão de células estaminais e biologia, células estaminais de disco espinal humano adulto foram isoladas e cultivadas monoclonalmente em aglomerados multicelulares semelhantes a esferas (discoferas). As discosferas da primeira série de culturas foram recolhidas, processadas e replantadas como células estaminais únicas para estudos de expansão em série utilizando cultura em suspensão, demonstrando que a expansão linear era possível. As discosferas e as células estaminais do disco espinal adulto foram plaqueadas em superfícies de cultura revestidas com matriz em meio de células estaminais durante várias horas para permitir a fixação e analisadas quanto aos biomarcadores de células estaminais. As discosferas e as células estaminais do disco espinal adulto foram plaqueadas em superfícies de cultura revestidas com laminina em meio condrogénico e condições de cultura durante 14 dias para as diferenciar em células NP. As células NP cultivadas a partir destas experiências demonstraram morfologia e fenótipo NP; Expressão do biomarcador NP, secreção de matriz extracelular e capacidade de passagem em série com possibilidade de grande expansão de volume. Estudos de engenharia de tecidos utilizando o “ensaio cinético de explosão” demonstraram que as discosferas possuem um notável desenvolvimento intrínseco e uma biologia de engenharia de tecidos que é robusta e organizada. Em resumo, as células estaminais do disco adulto e as células NP foram isoladas, cultivadas e caracterizadas a partir de tecidos saudáveis ​​de disco espinal. Estas descobertas demonstram o importante potencial a explorar para a utilização da engenharia de tecidos baseada em células estaminais para o tratamento da doença degenerativa do disco (DDD).