Jornal de pesquisa e terapia com células-tronco

Abstrato

Influência da idade do dador e do número de passagens na atividade angiogénica em meios condicionados com células estaminais derivadas do tecido adiposo humano

Takahiro Nakamura, Tomohiko Kazama, Yuki Nagaoka, Yasuji Inamo, Hideo Mugishima, Shori Takahashi e Taro Matsumoto

Introdução: As células estaminais/estromais derivadas do tecido adiposo (ASCs) são consideradas uma fonte celular promissora para a angiogénese terapêutica porque as células podem ser preparadas após um procedimento minimamente invasivo e porque segregam uma variedade de citocinas angiogénicas. No presente estudo foi examinada a influência da idade do dador e do número de passagens na atividade angiogénica do meio condicionado por ASC (ASC-CM).
Métodos: Os ASC humanos (idade do dador, 5 meses a 82 anos; n = 10) foram cultivados e os ASC-CM foram recolhidos nas passagens 2, 4 e 6. A atividade angiogénica do ASC-CM foi avaliada com o ensaio de formação de tubo utilizando um sistema no qual foram co-cultivadas células endoteliais da veia umbilical humana (HUVECs) e fibroblastos. As concentrações de fator de crescimento endotelial vascular A (VEGF-A) e de fator de crescimento hepático (HGF) em cada ASC-CM foram medidas através de um ensaio imunoenzimático.
Resultados: A idade do dador acima dos 60 anos afetou a capacidade proliferativa dos ASC na passagem 4 e seguintes. O ASCCM melhorou significativamente a formação de tubos HUVEC, e esta resposta não foi influenciada pela idade do dador. O ASC-CM na passagem 6 apresentou uma menor capacidade de formação de tubos em comparação com o ASC-CM na passagem 4, embora a capacidade ainda fosse equivalente ao controlo positivo (meio contendo 10 ng/mL de VEGF-A). A idade do dador acima dos 26 anos afetou os níveis de VEGF-A, mas não de HGF em ASC-CM, embora não tenhamos encontrado uma correlação direta entre os níveis de VEGF-A / HGF e a capacidade de formação de tubos.
Conclusão: Os nossos resultados demonstram um declínio dependente do número de passagens, mas independente da idade do dador, na atividade angiogénica do ASC-CM.