Jornal de pesquisa e terapia com células-tronco

Abstrato

Manutenção in vitro da mucosa olfativa: com células de revestimento olfativo enriquecidas

Neetu Singh, Saroj C Gopal, Rajeshwar N Srivastava, Tulika Chandra, Satya P Agarwal, Sanjay K Singh, Devendra K Gupta e Anil K Balapure

A Mucosa Olfativa Humana (OM) regula o olfato através da regeneração axonal e mielinização mediada por células estaminais e células de revestimento olfativo (OECs) residentes no nicho. As OEC purificadas/biópsias olfativas têm sido utilizadas para a recuperação funcional em diferentes modelos de lesão medular (LM). No entanto, relatórios recentes consideram isto discutível, onde propomos a cultura primária de MO, células basais do epitélio olfativo e células estaminais ecto-mesenquimais olfativas. As nossas condições de cultura definidas melhoram a vida útil do OM com o enriquecimento de OECs, proporcionando uma estratégia de emprego para a reparação de danos SCI/cocleares. Resumidamente, o OM pós-recolha foi fatiado não enzimaticamente, cultivado durante 6 semanas e as células caracterizadas morfologicamente, imunocitoquimicamente e western blotting. No dia 21, ~70% de OECs em forma de astrócitos e em forma de folha achatada, corados com GFAP e p75NTR, exibiram remielinização axonal. No dia 30, caspase 3, 8, 9 (produto genético e atividade), fosfo-p53 negativo; Foi encontrada uma massa celular densa e sobreposta positiva para GFAP e p75NTR. Isto foi acompanhado de alterações degenerativas em 6 semanas através da coloração com GFAP. Por outro lado, a tripsinação no dia 21 resultou em> 95% de OECs com morfologia achatada, positividade para GFAP e p75NTR. Os OEC derivados de humanos foram comparados com células de bolbo olfativo de rato SD de 2 dias cultivadas durante 2 semanas em meio F12 (GFAP e p75NTR positivo). Assim, a mucosa olfativa cultivada exibindo regeneração axonal com OECs em cultura fornece um veículo para estudos de reparação de danos cocleares/LM.