Jornal de pesquisa e terapia com células-tronco

Abstrato

Caracterização in vitro da maquinaria molecular que regula a angiogénese das células estaminais mesenquimais do sangue do cordão umbilical: um passo em direção à terapia com células estaminais multipotentes para a regeneração vascular

Santiago Roura, Juli R Bagó, Carolina Gálvez-Montón, Jerónimo Blanco e Antoni Bayes-Genis

As células estaminais mesenquimais (MSCs) derivadas do sangue do cordão umbilical (SCU) promovem o crescimento vascular in vivo. Aqui examinamos a maquinaria reguladora intracelular envolvida no comportamento angiogénico in vitro exibido pelas UCBMSCs. A atividade angiogénica foi medida no ensaio de cultura padrão baseado em Matrigel após tratamento das células com moduladores conhecidos do fator de resposta ao crescimento precoce (Egr-3) e da angiogénese das células endoteliais (EC). A expressão de Egr-3 foi avaliada por RT-PCR quantitativa e imunofluorescência indireta, e especificamente revogada através da tecnologia de pequeno RNA interferente (siRNA). Embora a adição de forbol-12-miristato-13-acetato (PMA) tenha promovido a capacidade angiogénica (P<0,001), os inibidores seletivos da PKC/MAPK/ERK anularam esta capacidade (P=0,016) nas UCBMSCs. O tratamento com PMA aumentou os níveis de mRNA e proteína de Egr-3 (P<0,001). No entanto, a ciclosporina A (CsA) e o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) não afetaram os níveis de Egr-3 nem a formação de redes celulares poligonais. O PMA induziu também a fosforilação de ERK1/2 , que foi abolida pelo inibidor seletivo U0126 (P=0,021 e P=0,014, respetivamente). Foi observada uma acentuada inibição da capacidade de formação de redes nas células transduzidas com siEgr-3 (P <0,001). Em conjunto, os nossos resultados destacam que o Egr-3 está comummente envolvido na maquinaria molecular que regula a CE madura e a angiogénese multipotente das CTM. Este conhecimento pode ser aplicado para aumentar a eficácia terapêutica contra as doenças vasculares humanas.