Química Moderna e Aplicações

Abstrato

Melhorias na cromatografia líquida de alto desempenho e nas condições de extração para a análise de ácidos gordos oxidados utilizando uma coluna rotativa de modo misto

Takao Sanaki, Takuji Fujihara, Ryo Iwamoto, Takeshi Yoshioka*, Kenichi Higashino, Toru Nakano e Yoshito Numata

A lipidómica por cromatografia líquida/espectrometria de massas tem sido utilizada para uma melhor compreensão do papel dos ácidos gordos oxidados no desenvolvimento de diversas doenças. No entanto, são necessários mais trabalhos para melhorar o processo de preparação das amostras e a cauda de pico dos cisteinil-leucotrienos. Neste estudo, avaliámos várias fases móveis e condições de extração. A adição de ácido fosfórico à fase móvel melhorou o pico de cauda dos cisteinil-leucotrienos. As condições de extração foram também otimizadas por coluna de spin possuindo propriedades de troca aniónica e de fase reversa. A eficiência de extração do sistema de extração modificado foi examinada utilizando 62 lípidos, e 13 lípidos deuterados foram investigados para avaliar os efeitos da matriz e a recuperação de amostras de homogeneizado de pulmão de ratinho. Foram obtidas eficiências de extração ≥70% para quase todos os lípidos. Foram obtidos bons resultados com desvios padrão <15% para os efeitos de matriz e recuperação. Finalmente, a eficiência do nosso método de extracção foi comparada com a de vários métodos convencionais, e a do leucotrieno C4 foi significativamente melhorada utilizando o nosso método. Além disso, a proporção de variância entre o nosso método e os métodos convencionais foi> 0,99 para todos os lípidos testados. Este método recentemente desenvolvido representa, portanto, uma ferramenta poderosa para analisar lípidos.