Jornal de pesquisa e terapia com células-tronco

Abstrato

Melhor direcionamento e maior retenção de células estaminais humanas, autólogas, derivadas de fibroblastos, induzidas e pluripotentes para os sarcómeros do miocárdio infartado com a ajuda de anticorpos tetravalentes heteroespecíficos de bioengenharia

Marek Malecki

Os ensaios clínicos, para regenerar o coração humano lesado por enfarte do miocárdio, envolvem a entrega de células estaminais no local da lesão. No entanto, apenas uma pequena fracção das células estaminais introduzidas é detectada no local da lesão, apenas duas semanas após esta intervenção terapêutica. Isto prejudica significativamente a eficácia da terapia com células estaminais. Para resolver o problema acima referido, desenvolvemos por bioengenharia genética e molecular anticorpos tetravalentes heteroespecíficos (htAbs), que têm uma excelente especificidade e elevada afinidade para as células estaminais humanas, pluripotentes, através dos domínios dos htAbs que se ligam ao SSEA-4, SSEA- 3, TRA- 1-60 e TRA-1-81, bem como em direção ao músculo cardíaco lesado através dos domínios htAbs que se ligam à miosina cardíaca humana, α-actinina, actina e titina. O tecido cardíaco foi adquirido a doentes que estavam a receber transplantes cardíacos. As células estaminais pluripotentes induzidas, autólogas, humanas (hiPSCs) foram geradas a partir de fibroblastos dos doentes por entrega não viral e expressão transitória das construções de ADN para: Oct4, Nanog, Sox2, Lin28, Klf4, c-Myc. Nos ensaios envolvendo os htAbs, as células estaminais pluripotentes humanas, induzidas, ancoraram nos sarcómeros miocárdicos com uma eficiência, estatisticamente, significativamente superior, do que nos ensaios com anticorpos inespecíficos ou sem anticorpos (p < 0,001). Além disso, a aplicação dos htAbs resultou na ligação cruzada das proteínas sarcoméricas para criar estruturas estáveis ​​para a ancoragem das células estaminais. Posteriormente, estas células estaminais pluripotentes induzidas humanas diferenciaram-se em cardiomiócitos nos seus locais de ancoragem. Através da bioengenharia destes novos anticorpos heteroespecíficos e tetravalentes e da sua utilização para guiar e ancorar as células estaminais especificamente nas estruturas sarcoméricas estabilizadas , demonstramos a prova de conceito in vitro para melhorar a eficácia da terapia regenerativa do enfarte do miocárdio e criamos as bases para o testes in vivo.