Jornal de Pesquisa e Terapêutica Biomolecular

Abstrato

Caracterização Imunoquímica da Sequência Específica da Proteína URG7

Ostuni A, Cuviello F, Salvia AM, D'Auria F, Statuto T, Di Nardoc E, Miglionico R, Carrettad V, Musto P e Bisaccia F

A URG7 é uma proteína antiapoptótica que consiste em 99 resíduos de aminoácidos regulados pelo antigénio x durante a infeção pelo VHB. Os primeiros 74 aminoácidos são idênticos aos da proteína 6 de resistência a múltiplos fármacos (MRP6), enquanto os resíduos de aminoácidos de 75 a 99 são específicos da proteína URG7. Foram realizadas ferramentas de imunoinformática e análise de estrutura secundária para identificar as propriedades antigénicas desta sequência URG7. O péptido 75-99 foi sintetizado pelo método de fase sólida, caracterizado estruturalmente por espectroscopia de CD e conjugado a um transportador proteico. Os coelhos brancos da Nova Zelândia foram imunizados e os soros foram testados para anticorpos específicos anti-peptídeos por ELISA e análise de Western blot. Finalmente foi realizado o teste ELISA com soros humanos.

Os coelhos imunizados com o péptido 75-99 produzem anticorpos que reconhecem tanto o péptido 75-99 como o polipéptido recombinante URG7. Além disso, ambos os antigénios permitiram a detecção de anticorpos anti-URG7 em soros de indivíduos saudáveis ​​e infectados pelo VHB, embora com um limiar discriminante diferente. Os nossos dados sugerem que o ensaio ELISA de peptídeo contra a sequência específica da proteína URG7 permite uma boa sensibilidade e especificidade para a deteção de anticorpos anti-URG7 em soros de doentes infetados com VHB.